Fetální prasečí pankreas – předběžné posouzení tkáně pro transplantace

, Author

Prasečí fetální pankreasy (PFP) získané od 4 březích prasnic byly spojeny, rozmělněny na fragmenty o velikosti 1 mm3 a studovány v orgánové kultuře po dobu až 30 dnů za účelem stanovení životaschopnosti tkáně a produkce inzulínu in vitro. Po 7-9 dnech v kultuře byly některé z těchto explantátů transplantovány do euglykemických, N:NIH-nu(s) nahých myší příjemců a histologicky studovány po dobu 69 dnů po transplantaci. Při použití RPMI 1640 doplněného 5 % fetálního telecího séra jako kultivačního média v prostředí 90 % vzduchu/10 % CO2 bylo zjištěno, že explantáty jsou životaschopné, přičemž in vitro byla zjištěna produkce inzulinu, která byla maximální 7. den (197 +/- 18,9 mU/l, n = 11) a poté postupně klesala. Ve 22. dni byly hladiny inzulinu nižší než 60,1 +/- 28,5 mU/L (n = 6). Histologické vyšetření explantátů ukázalo životaschopnou tkáň s důkazy mitóz přítomných v inzulin-pozitivních buňkách v 16. den in vitro. Po uplynutí této doby se životaschopnost tkáně snížila. Explantáty transplantované euglykemickým nahým myším nepodlehly během sledovaného období 69 dnů rejekci. Štěpy zůstaly životaschopné s důkazem zvýšení mitotické aktivity v endokrinní tkáni při barvení imunoperoxidázou. Tato předběžná šetření potvrzují, že explantáty pankreatu z prasečích plodů lze udržovat v kultuře až 16 dní. Tyto explantáty po transplantaci pod ledvinové pouzdro euglykemických nahých myší nepodléhaly nekróze, ale zůstaly životaschopné s důkazy mitóz v tkáni ostrůvků.

Napsat komentář

Vaše e-mailová adresa nebude zveřejněna.