Indikace pro testování
Testování EBV se používá k:
- Diagnostikovat symptomatickou nebo asymptomatickou infekci EBV, odhadnout dobu infekce a v některých případech, pomoci při diagnostice nádorových onemocnění souvisejících s EBV
- Diagnostikovat nebo určit riziko vzniku EBV-spojených s potransplantačními lymfoproliferativními poruchami (PTLD)
- Vyhodnocení nebo sledování EBV DNAémie (pozitivní nález EBV DNA) u imunosuprimovaných pacientů s cílem pomoci při rozhodování o léčbě
Laboratoř Testování
Diagnostika
Serologické testy
Test na heterofilní protilátky
Test na heterofilní protilátky (Monospot) je standardní diagnostický test na EBV IM u pacientů s příznaky IM. Ačkoli CDC nedoporučuje používat tento test pro počáteční hodnocení EBV IM, je často používán a je doporučován některými skupinami, včetně Infectious Diseases Society of America (IDSA), protože je rychlý a levný. Testování heterofilních protilátek má několik omezení. Test není užitečný u dětí mladších 5 let, protože mnohé z nich heterofilní protilátky nevytvářejí. Test má také nízkou citlivost a nízkou negativní prediktivní hodnotu u starších dětí a dospívajících. Kromě toho mohou pozitivní výsledky testu na heterofilní protilátky způsobit i jiné stavy.
Po negativních výsledcích by měly následovat sérologické testy k identifikaci specifických antigenů EBV a k potvrzení přítomnosti infekce EBV. Po pozitivních výsledcích může následovat vyšetření protilátek proti EBV k určení stadia infekce.
Testy specifických protilátek proti EBV
Testování specifických protilátek proti EBV na protilátky třídy imunoglobulinu G (IgG) a IgM proti virovému kapsidovému antigenu (VCA) a jadernému antigenu Epsteina-Barrové (EBNA) lze použít v návaznosti na negativní nebo pozitivní výsledky testů heterofilních protilátek. Tyto testy lze také použít místo testování heterofilních protilátek. Ačkoli jsou testy na EBV specifické protilátky citlivější než testy na heterofilní protilátky, jsou náročné na práci a mají delší dobu provedení.
Vzhledem k tomu, že protilátky se často objevují později v průběhu onemocnění, může být užitečné opakovat testování za 10-14 dní, pokud jsou výsledky nejednoznačné. Přítomnost nebo nepřítomnost určitých protilátek, jak je podrobně uvedeno níže, může indikovat stadium infekce.
| Infekce | VCA IgM | VCA IgG | EA | EBNA | |
|---|---|---|---|---|---|
| Nepředchozí | Negativní | Negativní | Negativní | Negativní | Negativní |
| Skrácený/primární | Pozitivní | Pozitivní | Pozitivní/negativní | Negativní | |
| Recentní | Pozitivní/negativní | Pozitivní | Pozitivní/negativní | Pozitivní/negativní | |
| Předchozí | Negativní | Pozitivní | Negativní | Pozitivní | |
| Reaktivacea | Pozitivní/negativní | Pozitivní | Pozitivní | Pozitivní | |
|
aProtilátka proti časnému antigenu v přítomnosti pozitivního testu EBNA neznamená automaticky, že současný zdravotní stav pacienta je způsoben reaktivací EBV. Zdraví jedinci bez příznaků mohou mít protilátky proti časnému antigenu i několik let po počáteční infekci EBV. Reaktivace se může vyskytnout subklinicky. EA, časný antigen Zdroje: CDC, 2018 ; Morrison, 2015 |
|||||
Serologické vyšetření může být užitečné také při hodnocení některých malignit spojených s EBV, ale jeho použití je omezené. Například zvýšené titry IgA namířené proti časným antigenům EBV a VCA a IgG namířené proti produktu genu EBV BRLF1 Rta svědčí pro karcinom nosohltanu. Protože však sérologické vyšetření není obecně užitečné pro diagnostiku lymfoproliferativních onemocnění a karcinomů souvisejících s EBV, dává se při diagnostice a léčbě těchto onemocnění přednost molekulárnímu vyšetření.
K detekci a/nebo kvantifikaci EBV DNA se používá polymerázová řetězová reakce
PCR, která může nabídnout vysokou citlivost a specifičnost. Může být upřednostňována před sérologií v případech reaktivace, ale sérologie může být citlivější a specifičtější v případech akutní infekce EBV, vzhledem k tomu, že pozitivní výsledek PCR s nižším počtem kopií nemusí rozlišit mezi klinicky nevýznamnými, latentně infikovanými buňkami a primární infekcí. Virová nálož EBV v periferní krvi pomocí PCR je součástí diagnostického vyšetření lymfoproliferativních onemocnění spojených s EBV a PTLD spojených s EBV, používá se k posouzení rizika vzniku PTLD a doporučuje se ke sledování EBV DNAemie u pacientů, kteří podstoupili transplantaci hematopoetických kmenových buněk (HSCT).
In situ hybridizace
Společně s fyzikálním vyšetřením a zobrazovacími vyšetřeními vyžaduje diagnostika lymfoproliferativních onemocnění spojených s EBV histologické vyšetření bioptické tkáně pomocí ISH na přítomnost transkriptů RNA kódovaných EBV. U pacientů s lymfoproliferativními lézemi hlavy a krku by měla být ISH na transkripty RNA kódované EBV prováděna rutinně, protože se jedná o nejcitlivější dostupný test pro detekci EBV v tomto prostředí.
Monitorování
U pacientů, kteří podstoupili HSCT, by mělo být monitorování virové nálože EBV zahájeno nejpozději 4 týdny po HSCT, mělo by pokračovat nejméně 4 měsíce a u vysoce rizikových pacientů by mělo být prováděno nejméně jednou týdně; u některých in pacientů může být indikováno delší nebo častější monitorování.