Intestinale parasitter er en alvorlig trussel mod både mennesker og husdyr i store dele af Afrika, Sydamerika og Asien. Resultaterne, der oprindeligt blev offentliggjort som et preprint på bioRxiv*, kan hjælpe forskerne med at forstå, hvordan voksne parasitter undgår immunsystemet og med at afprøve metoder til at øge immunresponset for at bekæmpe disse infektioner.
En parasits larve kan inficere mennesker og andre organismer gennem forurenet mad eller ved at trænge ind i den bare hud. Når først parasitterne vokser til voksne mennesker inde i kroppen, har immunsystemet svært ved at slippe af med dem, og forskere har fundet det udfordrende at studere immunceller i inficerede væv.
“Et stort problem har været vanskeligheden ved at udvinde immunceller fra en inficeret tarm, da infektionen forårsager meget stærke lokale reaktioner som f.eks. en intens produktion af celleslim for at forsøge at skylle ormene ud”, siger seniorforfatter Johannes Mayer, ph.d., forsker ved Malaghan Institute of Medical Research i Wellington, New Zealand.
Mayer og kolleger testede mange forskellige måder at udvinde immunceller fra tarmene på mus, der var inficeret med en tarmparasit kaldet Heligmosomoides polygyrus bakeri. De fleste af deres forsøg mislykkedes, men de udviklede til sidst en teknik, der isolerede millioner af immunceller fra de inficerede dyrs tarme. Teknikken indebærer tre vaske med EDTA, et middel til at fjerne slim, der varer i 10 minutter. Derefter følger 30 minutter i en opløsning med enzymer, der hjælper med at nedbryde vævet til de enkelte celler, og derefter cellefiltrering.
“Dette gjorde det muligt for os at studere de enkelte immunceller for første gang”, forklarer hovedforfatter Laura Ferrer-Font, ph.d., Staff Scientist ved Malaghan Institute of Medical Research. “Vi brugte en ny teknologi kaldet spektral flowcytometri til at se på mange forskellige typer af immunceller på samme tid og identificerede forskellige ændringer, der finder sted i løbet af parasitinfektionen.”
Teamet verificerede også, at de immunforandringer, de så i cellerne, var repræsentative for de immunforandringer, der opstod i det væv, der blev taget fra de inficerede dyr, hvilket sikrede, at celleudtrækningsprocessen ikke fordrejede deres resultater.”
“Nu hvor vi har fundet en måde at udtrække immunceller fra parasitinficerede tarme på, kan vi begynde at besvare vigtige spørgsmål om immunresponset,” slutter Mayer. “Denne teknik vil gøre det muligt for forskerne at bruge kraftfulde værktøjer som enkeltcellers RNA-sekventering til at studere immunresponset hos forskellige værter. Den kan også hjælpe dem, der studerer inflammatoriske tarmsygdomme eller fødevareallergier, med at udtrække enkeltceller fra tarmen med henblik på yderligere undersøgelser.”