Eredeti cikk

A 14C-karbamid légzési teszt pontossága a Helicobacter pylori diagnózisában
Hospital das Clinicas Faculty of Medicine of Ribeirão Preto, Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, São Paulo, Brazília.

• Ana Thereza Britto Gomes

• Luciano Kowalsky Coelho

• Marie Secaf

• José Luiz Pimenta Módena

• Luiz Ernesto de Almeida Troncon

• Ricardo Brandt de Oliveira

ABSTRACT

CONTEXT: A Helicobacter pylori-fertőzés kimutatására szolgáló egyszerű, pontos és alacsony költségű technikák kifejlesztése nagy jelentőséggel bír.
CÉLKITŰZÉS: A belélegzett levegő gyűjtésére szolgáló nagyon egyszerű készüléket alkalmazó 14C-karbamid légzéses gyorsteszt (UBT) pontosságának meghatározása.
TERVEZÉS: Prospektív vizsgálat.
BEÁLLÍTÁS: Ribeirão Preto orvosi karának Hospital das Clinicas kórháza.
RÉSZVEVŐK: Százharminchét felnőtt beteg, akik felső gasztrointesztinális endoszkópián estek át a Klinikai Kórházban. Helicobacter pylori (HP) szövettani vizsgálata; ureazteszt; karbamid kilégzési teszt (UBT).
Eredmények: Száztizenöt beteg volt HP-fertőzött (HP+) mind a szövettan, mind az ureáz-teszt szerint, 22 beteg pedig HP-negatív (HP-) volt ugyanezen két teszt szerint. Az UBT az ureáz-teszt és a szövettan kombinációjához hasonlóan képes volt különbséget tenni a HP+ és a HP- között. Ha az eredményeknek ezt a kombinációját tekintjük a HP-fertőzés “arany standardjának”, az UBT érzékenysége és specificitása egyaránt 90%-nál nagyobb a különböző határértékek és belélegzett levegő gyűjtési idők esetében.
Összefoglalás: A gyors UBT egy egyszerű légzéslevegő-gyűjtő eszközt alkalmazva nagy pontossággal határozza meg a HP-fertőzést.
KULCSSZAVAK: Helicobacter pylori. 14C-karbamid légzési teszt. Peptikus fekély.

BEVEZETÉS

A Helicobacter pylori (HP) és a peptikus fekélybetegség közötti kapcsolat felfedezése Warren és Marshall által több mint egy évtizeddel ezelőtt1 figyelemre méltó áttörést jelentett a felső gasztrointesztinális (GI) betegségek megértésében. Azóta óriási jelentőségre tett szert az a kérdés, hogyan lehet ezt a baktériumot a klinikai rutinban kimutatni. Jelenleg számos pontos módszer létezik a HP kimutatására, bár egyik sem tökéletes.

A HP elsődleges diagnózisának ideális megközelítése az endoszkópia elvégzése a szövettani biopsziás minta, az ureáz teszt vagy tenyésztés, vagy mindkettő elvégzése céljából, míg a HP fertőzés kezelés utáni diagnózisára a karbamid kilégzési tesztet (UBT) tartják a legjobb választásnak, ha nem szükséges a beteg endoszkópos újraértékelése, például nyombélfekély esetén.2-3.

Az UBT egyszerű, robusztus, nem invazív, pontos és olcsó.4 Intézményünkben egy-egy teszt 70 reájába kerül a béta-számláló ára nélkül. Indoklása a HP által termelt nagy mennyiségű ureáz: amikor a Helicobacter pylori-pozitív (HP+) alany szénizotóppal jelölt karbamidot vesz fel, az a gyomorban ammóniára és jelölt CO2-re bomlik. A megjelölt CO2 felszívódik a vérbe, és a belélegzett levegővel kilélegzik. A kiválasztott CO2-ből mintákat vesznek, és elemzik az izotóp jelenlétét. Két szénizotópot lehet használni: 14C, egy radioaktív izotóp és 13C, egy nem radioaktív izotóp.

Az UBT-t Graham és munkatársai5 , majd ettől függetlenül Marshal és Surveyor6 bevezetése óta számos, különböző bonyolultságú protokoll szerint alkalmazzák.7,8 Ebben a beszámolóban egy nagyon egyszerű 14C-UBT protokoll értékelését ismertetjük, amely egy egyszerű házi készítésű készüléket alkalmaz a levegőgyűjtéshez, ami ezért nagyon hasznosnak teszi a klinikai körülmények között.

MÓDSZEREK

A vizsgálatot a São Pauló-i Egyetem Ribeirão Preto Orvosi Karának Klinikai Kórháza orvosi kutatás etikai bizottsága hagyta jóvá.

A vizsgálatba száznegyvennyolc egymást követő felnőtt beteget (életkor > 18 év) vontak be a Klinikai Kórházba felső gasztrointesztinális endoszkópia céljából, és mindegyiküktől írásbeli beleegyező nyilatkozatot kaptak. Nem vonták be a vizsgálatba az esetlegesen terhes nőket, azokat a betegeket, akiknek a kórtörténetében gyomorműtét szerepelt, valamint azokat, akik nemrégiben antibiotikumot vagy protonpumpa-gátlót szedtek. Azokat a betegeket, akiknél mind az ureazteszt, mind a szövettan pozitív volt, HP+-nak, azokat pedig, akiknél mindkét teszt negatív volt, HP-nek tekintették. Azokat a betegeket, akiknél csak az egyik teszt volt pozitív, kizárták a vizsgálatból.

Ureáz teszt és szövettan

Az endoszkópia során két antrális és két testnyálkahártya-biopsziát vettek. Az antrális biopsziákat a nagyobb görbületben, a pylorustól közel 3 cm-re proximálisan vettük. Mindkét régióból egy-egy mintát közvetlenül a mintavétel után ureaztesztre használtunk (a Klinikai Kórház Ipari Gyógyszertárából). Az alkalmazott ureáz teszt hasonló volt a többi készítményhez: pepton 0,1 g; NaCl 0,5 g; glükóz 0,1 g; agar 1,0 g; 2% fenolvörös 2,5 ml; kálium-alkalikus foszfát 0,2 g; karbamid 2 g és desztillált víz q.s.p. 100 ml. A fennmaradó nyálkahártya-mintákat formalinban rögzítettük, paraffinba ágyaztuk és hematoxilin-eozin és Giemsa festékkel festettük. A tárgylemezeket egy patológus vizsgálta meg, aki nem ismerte a többi HP-vizsgálat eredményét.

UBT

UBT-t mindig az endoszkópiát követő egy héten belül végeztek. Egy éjszakai koplalás után alaplégzésmintát vettek, hogy biztosítsák a radioaktivitásmentességet. Közvetlenül ezt követően a betegek 185 KBq (5 mCi), 10 ml vízben feloldott 14C-karbamidot vettek be, és két további légzésmintát gyűjtöttek 15 és 30 perccel a bevitel után. A betegek egy műanyag fecskendő fúvókán keresztül fújtak, amely részben CaCl2-vel és vattával volt töltve, közvetlenül egy 20 ml-es üveg szcintillációs fiolába, amely 1,0 ml etanolt tartalmazott, amelyben 1 mmol hyamin volt feloldva, és amelyhez fenolftaleint adtak pH-indikátorként. A rózsaszínű (lúgos) oldat a CO2 telítődésekor színtelenné vált, ekkor már állandó mennyiségű (@ 1,0 mmol) CO2-t gyűjtöttünk.

Tíz ml szcintillációs oldatot adtunk minden egyes fiolába, és minden mintát folyékony szcintillációs számlálóban (LS 8100 Beckman, USA) megszámoltunk. Az egyes fiolákban lévő radioaktivitást percenkénti számlálásban (cpm) fejeztük ki.

A mért cpm értékek és az egyes minták háttéraktivitásának felhasználásával a percenkénti dezintegrációk számát (dpm) Marshall szerint számoltuk ki.9

Az adatok elemzése

A cpm értékeket a bevételt követő 15 és 30 percben, valamint e két érték közül a HP+ és HP- csoportban minden egyes alany esetében a nagyobbat ábrázoltuk specifikus grafikonokon, és a határértékeket a grafikonok vizuális ellenőrzésével határoztuk meg. A szenzitivitásokat és specificitásokat, valamint azok 95%-os konfidenciaintervallumait (95% CI) az SPSS for Windows programmal számoltuk ki.

eredmények

Tizenegy beteget kizártunk a vizsgálatból, mivel náluk az invazív tesztek közül csak az egyik volt pozitív, vagy az ureáz teszt (6 alany) vagy a szövettan (5 alany). A 137 megmaradt beteg közül 115 alany HP+ és 22 HP- volt. E csoportok klinikai és endoszkópos jellemzőit az 1. táblázat mutatja be.

A 14C-karbamid lenyelése után 15 perccel és 30 perccel kapott cpm-értékek szórásdiagramjai mind a HP+, mind a HP- csoportok esetében, valamint az egyes alanyok legmagasabb értéke az ábrán látható. Az ábrán látható, hogy a két csoport értékei között csak csekély átfedés van. Valójában a 115 HP+ alany közül csak 3-nál volt 1500 cpm-nél alacsonyabb érték, míg a HP- alanyok közül csak egynél volt 1500 cpm-nél magasabb érték, és egyiküknél sem volt 2000 cpm-nél magasabb az érték. A cpm-érték csak 9 (6,6%) alany esetében volt magasabb 30 percnél, mint 15 percnél. Az 1000, 1500 és 2000 cpm határértékekre kiszámított érzékenységek és specificitások mindig 90%-nál magasabbak voltak (2. táblázat).

A dpm-ben kifejezett aktivitásból számított érzékenységek és specificitások megegyeztek a cpm-ből számítottakkal.

MEGJEGYZÉS

A jelen vizsgálat eredményei azt mutatják, hogy a HP-fertőzés pontosan kimutatható egy egyszerűsített UBT segítségével. Ez az UBT képes megkülönböztetni a HP+ és HP- alanyokat a szövettani és az ureáz teszt kombinációjához hasonló módon. Valójában, ha a szövettani és az ureáz teszt kombinációját tekintjük a HP-fertőzés “arany standardjának”, az UBT számított érzékenysége és specificitása 90%-nál magasabb, és gyakran 95%-nál is magasabb. Ezek az eredmények megerősítik Marshall és munkatársai7 megállapításait, amelyek a gyors és könnyen elvégezhető UBT hasznosságát jelzik. Ezen túlmenően eredményeink azt mutatják, hogy egy nagyon egyszerű készüléket lehet alkalmazni a kilélegzett levegő összegyűjtésére a vizsgálat pontosságának csökkenése nélkül.

A jelen vizsgálat eredményei azt mutatják, hogy az UBT pontossága nem függ sem a komplex tesztétkezéstől, sem a teljes CO2-testtermelés kiszámításától, ahogyan azt egyes szerzők javasolják.8,10 Valójában a kis mennyiségű sima vízben hígított karbamid lenyelése – feltehetően azért, mert így az izotóp könnyebben érintkezik a gyomornyálkahártyával – 30 percen belül a radioaktivitás csúcsértékével jár, ami így korábbi, mint a kalóriadús tesztétkezés után tapasztalt érték. Ez gyakorlati szempontból azért fontos, mert a vizsgálatot könnyebb elvégezni, és ezzel időt takarít meg a beteg és a technikus számára.

Figyelemre méltó, hogy a 14CO2-kiválasztás a 14C-karbamid elfogyasztása után 15 perccel magasabb volt, mint 30 perccel a kísérleti személyek több mint 90%-ánál. Nem volt azonban szignifikáns különbség sem a két időpontban kapott adatokból számított érzékenységek, sem a specificitások között. Ez a megállapítás összhangban van Marshall és munkatársai7 adataival, amelyek a 14C-karbamid bevitelét követő 10 perctől 20 percig tartó 14CO2-platót mutattak ki.

Laboratóriumunkban a mért háttéraktivitások jóval alacsonyabbak voltak, mint a 14C-karbamid lenyelése után nyert kilégzett levegő mintákban mért összes aktivitás. Ennek következtében a dpm-ekből számított érzékenységek és specificitások eloszlása megegyezett a cpm-ekből számítottakkal. Ez a megállapítás azt jelzi, hogy a dpm-számítás gyakorlati szempontból használhatatlan.

A javaslat szerint az UBT pontosságának fokozását a 14C-karbamid kapszulában történő adagolásával lehet elérni, hogy elkerüljék az oropharynxban lévő ureáztermelő baktériumok okozta hamis pozitív eredményeket.11 A 14C-karbamid lenyelése után a szájon át történő 14CO2-termelés azonban azonnali és rövid ideig tartó, kevesebb mint 15 percig tartó.7 Eredményeink összhangban vannak ezekkel az adatokkal, mivel a HP+ és HP- alanyok eredményei közötti átfedés a HP+ alanyoktól származó értékek lefelé ferde eloszlása miatt következett be, nem pedig a HP- értékek HP+ alanyoktól kapott számszerű eredmények nagy része által meghatározott tartományban való elhelyezkedése miatt.

Végezetül, eredményeink alapján vagy az 1000 cpm vagy az 1500 cpm értéket kell választani határértéknek, attól függően, hogy magas érzékenységre, illetve magas specificitásra van-e szükség.

Ezt a vizsgálatot 14C-karbamiddal végeztük, amely kis, de biztonságos12 ionizáló sugárterhelést ró a betegekre. Mivel sugárzásmentes, a 13C-karbamid átvette a 14C-karbamid helyét a H. pylori légzési tesztekben. Fontos megjegyezni, hogy ez a két izotóp nagyon hasonló, ezért hasonló eredményeket adnak.

ÖSSZEGZÉS

A levegővételre szolgáló egyszerű készüléket alkalmazó gyors UBT nagy pontossággal határozza meg a HP-fertőzést.

1. Marshall BJ, Warren JR. Azonosítatlan görbült bacillusok a gyomorban gastritisben és peptikus fekélyben szenvedő betegek gyomrában. Lancet 1984;1:1311-4.

2. Katelaris PH, Jones DB. Helicobacter pylori-fertőzés vizsgálata antibiotikumos kezelést követően. Am J Gastroenterol 1997;92:1245-7.

3. The European Helicobacter pylori Study Group. Irányelvek a Helicobacter pylori fertőzés klinikai vizsgálataihoz. Gut 1997;41(suppl 2):S1-S23 .

4. Atherton JC, Spiller RC. A Helicobacter pylori kimutatására szolgáló karbamid kilégzési teszt. Gut 1994;35:723-5.

5. Graham DY, Klein PD, Evans DJ. Campylobacter pyloridis kimutatása 13C-karbamid teszttel. Lancet 1987;1:1174-8.

6. Marshall BJ, Surveyor I. Szén-14 karbamid kilégzési teszt a Campylobacter pylori okozta gyomorhurut diagnózisára. J Nucl Med 1988;29:11-7.

7. Marshall BJ, Plankey MW, Hoffman SR, et al. 20 perces légzési teszt a Helicobacter pylori kimutatására. Am J Gastroenterol 1991;86:438-45.

8. Raws EAJ. 14C-karbamid kilégzési teszt C. pylori gyomorhurutban. Gut 1989;30:798-803.

9. Marshall BJ. A 14C-karbamid légzésvizsgálat. In: Helicobacter pylori: technikák a klinikai diagnosztikában és az alapkutatásban. London: WB Saunders Company; 1996.p.83-93.

10. Steen T, Berstad K, Meling T et al. Az egy hét múlva megismételt 14C-karbamid teszt reprodukálhatósága. Am J Gastroenterol 1995;90:2103-5.

11. Hamlet AK, Erlandsson KIM, Olbe L, et al. Egyszerű, gyors és rendkívül megbízható kapszulás 14C-karbamid kilégzési teszt a Helicobacter pylori-fertőzés diagnózisára. Scand J Gastroenterol 1995;30:1058-63.

12. Stubbs JB, Marshall BJ. Sugárdózisbecslések a szén-14-jelzett karbamid kilégzési teszthez. J Nucl Med 1993;34:821-5.

RESUMO

CONTEXTO: O desenvolvimento de técnicas simples, acuradas e de baixo custo para a detecção da infecção do Helicobacter pylori tem grande interesse.
OBJETIVO: Determinar a acurácia de um teste respiratório rápido (UBT) que emprega dispositivo simples para coleção do ar expirado.
TIPO DE ESTUDO: Estudo prospectivo.
SITE: Hospital das Clínicas, Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto.
RÉSZTVEVŐK: 137 felnőtt beteg, akik felső emésztőrendszeri endoszkópián estek át a HCFMRP-ben, és hozzájárultak a kutatásban való részvételhez.
Vizsgált változók: szövettani és ureazteszt, UBT. Vizsgált változók: az UBT érzékenysége és specificitása.
Eredmények: 115 beteg volt HP-vel fertőzött a szövettani és az ureazteszt eredményei alapján, és 22 beteg volt HP-negatív ugyanezen tesztek alapján. Az UBT egyértelműen megkülönböztette ezt a két csoportot, és amikor a szövettani és az ureazteszt kombinációját tekintették a HP-fertőzés “arany standardjának”, az UBT specificitása és érzékenysége 90%-nál nagyobb volt különböző határértékek és légzésgyűjtési idők esetén.
Összefoglalás: A gyors UBT nagy pontosságú a HP-fertőzésre vonatkozóan.
KULCSSZAVAK: Helicobacter pylori. Légzési teszt. Gyomorfekély.

KIADÁSI INFORMÁCIÓ

Ana Thereza Britto Gomes, MD, MSc. orvosi kar, Universidade Federal da Bahia, Salvador, Bahia, Brazília.
Luciano Kowalsky Coelho, MD. Blumenaui Orvosi Kar, Blumenau, Santa Catarina, Brazília.
Marie Secaf, biológus. Hospital das Clinicas of Ribeirão Preto, São Paulo-i Egyetem, Ribeirão Preto, São Paulo, Brazília.
José Luiz Pimenta Módena, MD. A Ribeirão Preto Orvosi Karának adjunktusa, Ribeirão Preto, São Paulo, Brazília.
Luiz Ernesto de Almeida Troncon, MD. A Ribeirão Preto Orvosi Karának docense, Ribeirão Preto, São Paulo, Brazília.
Ricardo Brandt de Oliveira, MD. A Ribeirão Preto Orvosi Kar professzora, Ribeirão Preto, São Paulo, Brazília.

A finanszírozás forrásai: A kutatás a FAPESP (1997/10502-9 számú támogatás) és a Ribeirão Preto Orvosi Kar Klinikai Kórházának Kutatási és Támogatási Alapja (FAEPA-HCFMRP) pénzügyi támogatásával valósult meg.
Érdekütközés: Nem jelentettük be
Első benyújtás dátuma: 1998. december 15.
Utolsó beérkezés: 2002. február 28.
Elfogadva: 2002. március 20.