Az egzotikus hüllők az utóbbi években egyre nagyobb népszerűségnek örvendenek háziállatként. Ez a népszerűségnövekedés a hüllőkkel kapcsolatos szalmonellafertőzések számának növekedéséhez vezetett, amelyek évente fordulnak elő az Egyesült Államokban (jelenleg becslések szerint 93 000) (4; J. Mermin, L. Hutwagner, D. Vugia, P. Kirley, J. Bender, J. Koehler, T. McGivern, R. Marcus, F. Angulo, and the FoodNet Working Group, 36th Annu. Meet. Infect. Dis. Soc. Am., 1998 ). Úgy tűnik, hogy a 10 év alatti gyermekek és az immunhiányos emberek különösen hajlamosak a hüllőkkel kapcsolatos Salmonella spp. fertőzésekre, és gyakran súlyos klinikai lefolyásúak, beleértve a szeptikémia és agyhártyagyulladás miatti halálos kimenetelű fertőzéseket (2, 4). Ezért 1975-ben az Egyesült Államok kormánya betiltotta az elölről hátrafelé 4 hüvelyknél kisebb páncélú teknősök kereskedelmét. Ez az intézkedés a teknősökkel kapcsolatos szalmonellózis 77%-os csökkenéséhez vezetett (5). Az egzotikus hüllők háziállatként való növekvő népszerűsége miatt azonban a hüllőkkel összefüggő szalmonellózis előfordulása még mindig növekszik. Például a Salmonella enterica subsp. houtenae Marina szerovar emberből történő izolálása az 1989-es 2 esetről 1998-ra 47 esetre nőtt, és a S. enterica serovar Poona esetek száma az 1989-es 199-ről 1998-ra 341-re emelkedett (3). A hüllőkkel összefüggő szalmonellózisban szenvedő betegekből izolált fő szerotípusok közé tartoznak a S. enterica subsp. diarizonae (IIIb) szerovarok, a S. enterica subsp. houtenae (IV) Chameleon és Marina szerovarok, valamint a S. enterica subsp. enterica (I) szerovarok Java, Stanley és Poona (1). Nagyon gyakran a teknősöket és a leguánokat, amelyeket gyakran szabadon engednek az állattartók otthonában kóborolni, és amelyek a gyermekek háziállataiként szolgálnak, azonosították az emberi fertőzés forrásaként. Ezenkívül kukoricakígyókat, pitonokat és boákat is azonosítottak már szalmonellafertőzés forrásaként (1, 4, 5). A népi gyógyászatban használt szárított csörgőkígyó-készítmények súlyos, halálos kimenetelű szalmonellafertőzésekhez vezettek (7, 11).
Noha különböző hüllőket, például leguánokat, teknősöket és kígyókat utólagosan emberi szalmonellózis forrásaként írtak le (5, 8, 11), nem világos, hogy egyes hüllőfajok milyen gyakran kolonizálódnak szalmonellafajokkal. Ezért prospektív módon két tenyészkígyócsoport székletmintáit vizsgáltuk a szalmonella jelenlétére.
A szalmonella előfordulásának felmérésére 10 orrszarvú viperától (Bitis nasicornis, Shaw 1802) és 6 szempillás viperától (Bothriechis schlegelii, Berthold 1846) friss székletmintát gyűjtöttünk cserebogárral, és azonnal feldolgoztuk az enterális kórokozók kimutatására szolgáló standard protokoll szerint. Ez a protokoll a Német Higiéniai és Mikrobiológiai Társaság ajánlásait követi, és magában foglalja a nem szelektív véragar, a MacConkey-agar, a szelenit dúsító leves, valamint a szalmonella-szelektív szalmonella-shigella agar és a xilóz-lizin-deoxikolát agar használatát. Valamennyi agarlemezt 48 órán át inkubáltuk 37 °C-on. A 24 és 48 óra elteltével az agárlemezeket megvizsgáltuk a szalmonella növekedése szempontjából. A dúsítólevet 18 órán át 37°C-on inkubáltuk, majd átvittük szalmonella-shigella agarra és xilóz-lizin-deoxikolát agarra, amelyeket további 24 órán át 37°C-on inkubáltunk. Az azonosítás az API E azonosító rendszerek (BioMerieux, Lyon, Franciaország) segítségével történt. A szerotipizálás közvetlen agglutinációval történt mikrolemezeken (6) az Enterális Patogének Nemzeti Referencia Központjában (Institut für Hygiene und Umwelt, Hamburg, Németország). Az ellenszérumok előállítása új-zélandi nyulak immunizálásával történt az Egészségügyi Világszervezet irányelveinek megfelelően (9). A pulzálómezős gélelektroforézishez (PFGE) a genomiális DNS-t XbaI-vel emésztettük. Az így kapott fragmentumokat 1%-os agaróz gélben CHEF DR III rendszerrel (Bio-Rad Laboratories, Richmond, Calif.) oldottuk fel. Az ütemezett impulzusidők 5 és 35 s között voltak 32 órán keresztül 6 V-on és 14°C-on. A géleket etídium-bromiddal festettük meg, desztillált vízben desztilláltuk, és UV megvilágításban fényképeztük. A PFGE-profilokat a Tenover és munkatársai (10) által meghatározott kritériumok szerint elemezték.
A IIIb szerocsoportba tartozó Salmonella-törzseket az összes B. nasicornis kígyó és a hat B. schlegelii kígyó közül háromnak a székletmintáiból izolálták. A szerológiai tipizálási eredmények áttekintése az 1.1. táblázatban található. Összesen a Salmonella IIIb szerocsoport 12 szerovárját izolálták, a 48:i:z volt az egyetlen olyan szerovár, amelyet különböző kígyókból izoláltak. Négy állattól 1 és 22 hónapos időszakon keresztül nyertek nyomon követési mintákat. Mindegyik kígyó tartósan kolonizálódott a Salmonella IIIb szerocsoport törzseivel. A szerotipizálás azonos törzseket mutatott ki a B. nasicornis 5 kígyóban a teljes követési időszak alatt (1. táblázat).1). E törzsek klonális azonosságát PFGE-vel igazolták (1. ábra (1. ábra).1). A másik három kígyó kolonizáló Salmonella-szerovarok változásait mutatták ki a követés során (Táblázat (1. táblázat).1). A 2. B. nasicornis kígyó esetében a 17:l,v:z35 szalmonella szerotípusról 1 hónapon belül a 48:i:z szalmonella szerotípusra változott. Ez a törzs azonos volt a B. nasicornis kígyó 3-ból izolált törzzsel, amint azt a PFGE kimutatta (1. ábra).1). A B. nasicornis kígyókból izoláltaktól eltérő, azonos 48:i:z szalmonella szerotípusú klónokat találtak két B. schlegelii kígyóban is (1. ábra).1). Ez az eredmény annak tudható be, hogy a két B. nasicornis kígyót, valamint a két B. schlegelii kígyót, amelyekben ez a szerovariáns volt jelen vizsgálat előtt tenyésztési céllal együtt tartották. Az ebben a vizsgálatban vizsgált összes többi állatot mindig egyedül, külön ketrecben tartották. A B. nasicornis 10-es kígyóból izolált 48:i:z szalmonella szerotípusú törzs PFGE-analízise eltérő sávozási mintázatot mutatott.
PFGE of 12 Salmonella serogroup IIIb isolates. 1. sáv, az 50:r:z53 szerovar izolátuma a B. nasicornis kígyó 1-ből; 2-6. sáv, a 48:i:z szerovar izolátumai a B. nasicornis kígyó 2 és 3 (2. és 3. sáv), a B. nasicornis kígyó 10-ből (4. sáv), valamint a B. schlegelii kígyó 1 és 3 (5. és 6. sáv); 7. sáv, az 59:z10:z53 szerovar izolátuma a B. nasicornis kígyó 1-ből (5. és 6. sáv); 7. sáv, az 59:z10:z53 szerovar izolátuma B. nasicornis kígyó 4-ből; 8. és 9. sáv, a 61:i:z szerovár izolátumai a B. nasicornis kígyó 5-ből; 10-12. sáv, a 61:c:z35 (10. sáv) és a 47:z52:e,n,x,z15 szerovár izolátumai (11. és 12. sáv) a B. nasicornis kígyó 9-ből.
1. TÁBLA.
A 13 kígyóból izolált Salmonella IIIb szerocsoport törzsek szerotipizálásának eredményei
| Kígyó | Kor (év) | O antigén | H1 antigén | H2 antigén | |
|---|---|---|---|---|---|
| B. nasicornis | |||||
| 1 | 3 | 3 | 50 | r | z53 |
| 2 | 3 | 17 | l,v | z35 | |
| 48 | i | z | |||
| 3 | 4 | 48 | i | z | |
| 4 | 0.5 | 59 | z10 | z53 | |
| 5 | 0.5 | 61 | i | z | |
| 61 | i | z | |||
| 6 | 5 | 18 | l,v | z | |
| 7 | 5 | 50 | r | z | |
| 8 | 3 | 38 | k | z | |
| 50 | z52 | z35 | |||
| 9 | 3 | 61 | c | z35 | |
| 47 | z52 | e,n,x,z15 | |||
| 47 | z52 | e,n,x,z15 | |||
| 10 | 3 | 48 | i | z | |
| B. schlegelii | |||||
| 1 | 3 | 48 | i | z | |
| 2 | 2 | 50 | k | z | |
| 3 | 2 | 48 | i | z |
Az antibiotikum-vizsgálatot korongdiffúziós módszerrel végezték, és valamennyi Salmonella-izolátum érzékenységét kimutatták penicillinekkel, cefalosporinokkal, karbapenemekkel, aminoglikozidokkal és fluorokinolonokkal szemben.
Nem világos, hogy a kígyók méhen belül, perinatálisan, fertőzött zsákmány lenyelésével vagy más hüllők fertőzött ürülékével való érintkezés útján szerezték-e a szalmonellát. A 16 házikígyóból álló vizsgálati csoportunkban a Salmonella IIIb szerocsoport magas prevalenciát mutatott (81%). A vizsgált kígyók száma túl kicsi a statisztikai elemzéshez, de a B. nasicornis kígyók 100%-a kolonizálódott, míg a B. schlegelii kígyóknak csak 50%-ában volt kimutatható a Salmonella IIIb szerocsoport. Ez a megállapítás a kígyófajok eltérő viselkedésének tudható be. A B. nasicornis talajlakó kígyó, míg a B. schlegelii bokrokban és fákon él. Különösen, ha ezeket a kígyókat terráriumokban tartják, a B. nasicornis esetében fokozott a kockázata annak, hogy fertőzött ürülékkel érintkezik. Az a megfigyelés, hogy azok a kígyók, amelyeket egy ideig együtt tartottak, azonos Salmonella IIIb szerocsoport izolátumokat mutattak, alátámasztja azt a feltételezést, hogy a kolonizáció elsősorban a szennyezett ürülékkel való érintkezés útján történik. Ráadásul a B. nasicornis csoportot kizárólag olyan szállítótól származó rágcsálókkal etették, akinek az állatok felügyeleti tenyészete rendszeresen negatív volt bélrendszeri kórokozókra, köztük a Salmonella spp. tekintetében. Ezért a kígyók e tenyészcsoportjában a szennyezett préda általi átvitel nagyon valószínűtlen.
A mi tanulmányunk az első prospektív vizsgálat a Salmonella IIIb szerocsoport szerovarok prevalenciájáról két házikígyó tenyészcsoportban. Eredményeink azt mutatják, hogy a kígyók nagyon magas százalékban kolonizálódnak Salmonella spp. ez a megállapítás nyilvánvalóan különösen a földön élő kígyókra vonatkozik. A hüllőkkel kapcsolatos szalmonellafertőzések megelőzésére a Centers for Disease Control and Prevention ajánlásokat adott ki a hüllők kezelésére vonatkozóan. A szokásos ajánlások mellett, mint például az alapos szappanos és vizes kézmosás a hüllők vagy a hüllő ketrecek kezelése után, ezek az ajánlások előírják, hogy a hüllőket (i) nem szabad gyermekgondozási központokban tartani, (ii) nem szabad olyan háztartásokban tartani, ahol 1 évesnél fiatalabb gyermekek és immunhiányos személyek tartózkodnak, és (iii) nem szabad szabadon kóborolni az otthonban vagy a lakótérben (4).
.