ヒト血清アルブミン 化学的性質、用途、生産

化学的性質

固体

精製方法

アルブミンは導電性水に溶解し2-4℃でイオン交換塔2本に通し精製します、それぞれの塔には2:アニオンとカチオンの混合樹脂(Amberlite IR-120, H-form, Amberlite IRA-400, OH -form)を使用し、2-4℃で通液する。 この処理により、イオンと脂質の不純物が除去されます。 CO2が入らないように注意し、溶液は-15℃で保存されます。 より完全な脂質除去は、脱イオン化溶液を凍結乾燥し、乾燥アルブミン（ヒト血清）をイソオクタン中の5％氷酢酸（v/v）の混合物（あらかじめNa2SO4で乾燥）で覆い、0oで（撹拌せずに）6時間以上放置してから抽出混合物をデカンテーションして捨て、イソオクタンで洗浄、再抽出、最後にイソオクタンで2回洗浄すれば可能である。 精製アルブミンは、真空下で数時間乾燥させた後、室温で12-24時間水に対して透析し、凍結乾燥し、-10℃で保存する。 CohnのフラクションVから高EtOH溶液（35％）および低EtOH溶液（22％）で再結晶化した。高EtOH再結晶は次の通りである。 5℃のFraction V アルブミンペースト1kgに、-10℃に予冷した35% EtOH中の0.4 M pH (pH 5.5) 酢酸バッファーを300mL、同じく-10℃の25% EtOH中の0.1 M NaOAcを430mL加えます。 緩衝液の全量とNaOAcの約半分を加え、1時間ゆっくり撹拌すると、最良の結果が得られる。 残りのNaOAcは、すべての塊が崩壊したときに添加する。 この混合物を-5℃で数日間放置し、結晶化させる。 その後、35% EtOH (1 L) を加えて結晶懸濁液を希釈し、イオン強度を下げてから-5℃で遠心分離する (収率 80%) 。 結晶をさらに1.5容量の15% EtOH/0.02M NaClに-5℃で溶解し、洗浄した焼成珪藻土で濾過して清澄化する。 この溶液は、最初の結晶化の条件に再調整して再結晶化してもよいし、ごく少量のデカノール（最終濃度0.02%を与えるのに十分な量）の助けを借りて22% EtOHで再結晶化してもよい。 より低いEtOH濃度からの結晶化は、より良い精製（すなわち、グロブリンおよび炭水化物を除去することによって）およびより安定な生成物を生成したことに留意されたい。 低EtOH再結晶は以下の通りである。 10℃〜-15℃のフラクションV 1kgに、-5℃の15%EtOH 500mLを加え、均一な懸濁液が形成されるまでゆっくりと撹拌する。 15% EtOH (500mL)に 0℃で 0.2M NaHCO3 溶液 (125-150mL) を加え、pH (1:10 希釈) を 5.3 に調整する。 このとき、若干の温度上昇が生じるので、温度を保つように注意する。 ヒト血清アルブミン調製用製品および原材料