Eksoottiset matelijat ovat nauttineet kasvavasta suosiosta lemmikkieläiminä viime vuosina. Tämä suosion kasvu on johtanut Yhdysvalloissa vuosittain esiintyvien matelijoihin liittyvien salmonellatartuntojen määrän kasvuun (tällä hetkellä arviolta 93 000) (4; J. Mermin, L. Hutwagner, D. Vugia, P. Kirley, J. Bender, J. Koehler, J. Koehler, T. McGivern, R. Marcus, F. Angulo, and the FoodNet Working Group, 36th Annu. Meet. Infect. Dis. Soc. Am., 1998 ). Alle 10-vuotiaat lapset ja heikentyneen immuunijärjestelmän omaavat henkilöt näyttävät olevan erityisen alttiita matelijoihin liittyvien Salmonella spp:n aiheuttamille infektioille, ja heillä esiintyy usein vakavia kliinisiä taudinkulkuja, mukaan lukien verenmyrkytyksen ja aivokalvontulehduksen aiheuttamat kuolemantapaukset (2, 4). Tästä syystä Yhdysvaltain hallitus kielsi vuonna 1975 sellaisten kilpikonnien kaupan, joiden selkäkilpikonna on edestä taaksepäin pienempi kuin 4 tuumaa. Tämä toimenpide johti kilpikonniin liittyvän salmonelloosin vähenemiseen 77 prosentilla (5). Koska eksoottiset matelijat ovat yhä suositumpia lemmikkeinä, matelijoihin liittyvän salmonelloosin esiintyvyys on kuitenkin edelleen kasvussa. Esimerkiksi Salmonella enterica subsp. houtenae serovar Marinan eristäminen ihmisistä lisääntyi kahdesta tapauksesta vuonna 1989 47 tapaukseen vuonna 1998, ja S. enterica serovar Poonan tapausten määrä kasvoi 199 tapauksesta vuonna 1989 341 tapaukseen vuonna 1998 (3). Tärkeimpiä matelijoihin liittyvää salmonelloosia sairastavista potilaista eristettyjä serotyyppejä ovat S. enterica subsp. diarizonae (IIIb) -serotyypit, S. enterica subsp. houtenae (IV) -serotyypit Chameleon ja Marina sekä S. enterica subsp. enterica (I) -serotyypit Java, Stanley ja Poona (1). Hyvin usein kilpikonnat ja iguaanit, joiden annetaan usein liikkua vapaasti eläintenhoitajien kodeissa ja jotka toimivat lasten lemmikkeinä, on todettu ihmisten tartuntalähteiksi. Lisäksi myös maissikäärmeet, pytonit ja boat on todettu salmonellatartuntojen lähteiksi (1, 4, 5). Kansanlääkinnässä käytetyt kuivatut kalkkarokäärmevalmisteet ovat johtaneet vakaviin salmonellainfektioihin, joihin on liittynyt kuolemantapauksia (7, 11).

Vaikka erilaisia matelijoita, kuten iguaaneja, kilpikonnia ja käärmeitä, on kuvattu taannehtivasti ihmisten salmonelloosin lähteinä (5, 8, 11), on epäselvää, kuinka usein tietyt matelijalajit kolonisoituvat salmonellalajeilla. Siksi olemme seuloneet prospektiivisesti ulostenäytteitä kahdesta käärmeiden kasvatusryhmästä salmonellan esiintymisen varalta.

Salmonellan esiintyvyyden arvioimiseksi tuoreet ulostenäytteet kerättiin 10:ltä sarvikuonokäärmeeltä (Bitis nasicornis, Shaw 1802) ja 6:lta silmäripsien käärmeeltä (Bothriechis schlegelii, Berthold 1846) pyyhkäisynäytteen avulla ja ne käsiteltiin välittömästi standardinmukaisen protokollaa noudattaen suolistoperäisten sairauksien patogeenien havaitsemiseksi. Tämä protokolla noudattaa Saksan hygienia- ja mikrobiologiyhdistyksen suosituksia, ja siihen sisältyy ei-selektiivisen veriagarin, MacConkey-agarin, Selenite-rikastusliemen ja salmonellan suhteen selektiivisten agarien salmonella-shigella-agarin ja ksyloosi-lysiini-deoksikolaattiagarin käyttö. Kaikkia agarilevyjä inkuboitiin 48 tuntia 37 °C:ssa. Agarlevyt tarkastettiin 24 ja 48 tunnin kuluttua salmonellan kasvun varalta. Rikastuslientä inkuboitiin 18 tuntia 37 °C:ssa, minkä jälkeen se siirrettiin salmonella-shigella-agarille ja ksyloosi-lysiini-deoksikolaattiagarille, joita inkuboitiin 37 °C:ssa vielä 24 tuntia. Tunnistaminen tehtiin API E -tunnistusjärjestelmillä (BioMerieux, Lyon, Ranska). Serotyypin määritys tehtiin suoralla agglutinaatiolla mikroskoopilla (6) kansallisessa suolistopatogeenien vertailukeskuksessa (Institut für Hygiene und Umwelt, Hampuri, Saksa). Antiseerumit tuotettiin immunisoimalla uusiseelantilaisia kaneja Maailman terveysjärjestön ohjeiden mukaisesti (9). Pulssi-geelielektroforeesia (PFGE) varten genominen DNA sulatettiin XbaI:llä. Näin saadut fragmentit erotettiin 1-prosenttisella agaroosigeelillä CHEF DR III -järjestelmällä (Bio-Rad Laboratories, Richmond, Calif.). Ramped-pulssiajat vaihtelivat 5 ja 35 sekunnin välillä 32 tunnin ajan 6 V:ssa ja 14 °C:ssa. Geelit värjättiin etidiumbromidilla, puhdistettiin tislatulla vedellä ja valokuvattiin UV-valaistuksessa. PFGE-profiilit analysoitiin Tenoverin ja työtovereiden (10) esittämien vakiintuneiden kriteerien mukaisesti.

Salmonellakannat seroryhmästä IIIb eristettiin kaikkien B. nasicornis -käärmeiden ulostenäytteistä ja kolmesta kuudesta B. schlegelii -käärmeestä. Taulukossa Taulukko1.1 on yleiskatsaus serologisista tyypitystuloksista. Salmonella-seroryhmän IIIb:n serovareja eristettiin yhteensä 12, joista 48:i:z oli ainoa serovari, joka eristettiin eri käärmeistä. Seurantanäytteitä otettiin neljästä eläimestä 1-22 kuukauden aikana. Kaikki nämä käärmeet olivat pysyvästi kolonisoituneet Salmonella seroryhmä IIIb -kannoilla. Serotyypitys osoitti identtisiä kantoja B. nasicornis -käärmeessä 5 koko seurantajakson ajan (taulukko (Taulukko1).1). Näiden kantojen klonaalinen identiteetti osoitettiin PFGE:llä (Kuva (Kuva1).1). Kolmessa muussa käärmeessä havaittiin kolonisoivien Salmonella-serotyyppien muutoksia seurannan aikana (taulukko (Taulukko (Taulukko1).1). B. nasicornis -käärmeessä 2 ilmeni muutos Salmonella-serotyypistä 17:l,v:z35 Salmonella-serotyyppiin 48:i:z kuukauden kuluessa. Tämä kanta oli identtinen B. nasicornis -käärmeestä 3 eristetyn kannan kanssa, kuten PFGE osoitti (kuva (Kuva (Kuva 1).1). Salmonellan serotyypin 48:i:z identtisiä klooneja, jotka erosivat B. nasicornis -käärmeistä eristetyistä klooneista, löydettiin myös kahdesta B. schlegelii -käärmeestä (kuva (kuva 1).1). Tämä tulos voi johtua siitä, että kahta B. nasicornis -käärmettä sekä kahta B. schlegelii -käärmettä, joilla oli tämä serovar, oli ennen tätä tutkimusta pidetty yhdessä jalostustarkoituksessa. Kaikkia muita tässä tutkimuksessa tutkittuja eläimiä pidettiin aina yksin erillisissä häkeissä. B. nasicornis -käärmeestä 10 eristetyn salmonellan serotyypin 48:i:z kannan PFGE-analyysi osoitti erilaista kaistakuviota.