Reptilele exotice s-au bucurat de o popularitate crescândă ca animale de companie în ultimii ani. Această creștere a popularității a dus la o creștere a numărului de infecții cu salmonella asociate reptilelor care apar în fiecare an în Statele Unite (estimate în prezent la 93.000) (4; J. Mermin, L. Hutwagner, D. Vugia, P. Kirley, J. Bender, J. Koehler, T. McGivern, R. Marcus, F. Angulo și Grupul de lucru FoodNet, 36th Annu. Meet. Infect. Dis. Soc. Am., 1998 ). Copiii cu vârsta sub 10 ani ș i persoanele imunocompromise par a fi deosebit de predispuș i la infecții cu Salmonella spp. asociate cu reptile ș i prezintă adesea evoluții clinice grave, inclusiv decese datorate septicemiei ș i meningitei (2, 4). Din acest motiv, în 1975, guvernul Statelor Unite a interzis comerțul cu broaște țestoase cu carapace mai mici de 4 inci din față în spate. Această măsură a dus la o reducere cu 77% a salmonelozei asociate broaștelor țestoase (5). Cu toate acestea, din cauza popularității crescânde a reptilelor exotice ca animale de companie, incidența salmonelozei asociate reptilelor este în continuare în creștere. De exemplu, izolarea Salmonella enterica subsp. houtenae serovar Marina de la oameni a crescut de la 2 cazuri în 1989 la 47 de cazuri în 1998, iar numărul de cazuri de S. enterica serovar Poona a crescut de la 199 în 1989 la 341 în 1998 (3). Principalele serotipuri izolate de la pacienții cu salmoneloză asociată reptilelor includ serotipurile S. enterica subsp. diarizonae (IIIb), S. enterica subsp. houtenae (IV) serotipurile Chameleon ș i Marina ș i S. enterica subsp. enterica (I) serotipurile Java, Stanley ș i Poona (1). Foarte frecvent, broaștele țestoase și iguanele, care sunt adesea lăsate să se plimbe liber în casele îngrijitorilor și servesc drept animale de companie pentru copii, au fost identificate ca surse de infecție umană. În plus, șerpii de porumb, pitonii și boa au fost, de asemenea, identificați ca surse de infecții cu Salmonella (1, 4, 5). Preparatele uscate de șarpe cu clopoței folosite în medicina populară au dus la infecții severe cu Salmonella, cu decese (7, 11).

Deși diverse reptile, cum ar fi iguanele, broaștele țestoase și șerpii, au fost descrise retrospectiv ca surse de salmoneloză umană (5, 8, 11), nu este clar cât de frecvent anumite specii de reptile sunt colonizate de specii de Salmonella. Prin urmare, am analizat prospectiv probele fecale de la două grupuri de șerpi de reproducere pentru a detecta prezența Salmonella.

Pentru a evalua prevalența Salmonella, au fost colectate probe proaspete de scaun de la 10 vipere cu coarne de rinocer (Bitis nasicornis, Shaw 1802) și 6 vipere cu gene (Bothriechis schlegelii, Berthold 1846) cu un swap și prelucrate imediat în conformitate cu un protocol standard pentru detectarea agenților patogeni enterici. Acest protocol respectă recomandările Societății Germane de Igienă și Microbiologie și include utilizarea agarului neselectiv pentru sânge, a agarului MacConkey, a unui bulion de îmbogățire cu selenit și a agarurilor selective pentru Salmonella, agar salmonella-shigella și agar xiloză-lizină-deoxicolat. Toate plăcile de agar au fost incubate timp de 48 de ore la 37 °C. După 24 și 48 de ore, plăcile de agar au fost inspectate pentru a se verifica dacă Salmonella s-a dezvoltat. Bulionul de îmbogățire a fost incubat timp de 18 ore la 37°C și apoi a fost transferat pe agar salmonella-shigella și agar xiloză-lizină-deoxicolat, care au fost incubate la 37°C timp de încă 24 de ore. Identificarea s-a realizat cu ajutorul sistemelor de identificare API E (BioMerieux, Lyon, Franța). Serotiparea a fost realizată prin aglutinare directă pe microslide (6) la Centrul Național de Referință pentru Patogeni Enterici (Institut für Hygiene und Umwelt, Hamburg, Germania). Generarea antiserurilor a fost realizată prin imunizarea iepurilor neozeelandezi în conformitate cu orientările Organizației Mondiale a Sănătății (9). Pentru electroforeza în gel în câmp pulsat (PFGE), ADN genomic a fost digerat cu XbaI. Fragmentele rezultate au fost rezolvate într-un gel de agaroză 1% cu un sistem CHEF DR III (Bio-Rad Laboratories, Richmond, California). Timpii de impulsuri în rampă au variat între 5 și 35 s pe parcursul a 32 de ore la 6 V și 14°C. Gelurile au fost colorate cu bromură de etidiu, dezlipite în apă distilată și fotografiate sub iluminare UV. Profilurile PFGE au fost analizate în conformitate cu criteriile stabilite de Tenover și colaboratorii (10).

Sunt izolate tulpini de Salmonella din serogrupul IIIb din probele fecale ale tuturor șerpilor B. nasicornis și de la trei din cei șase șerpi B. schlegelii. O prezentare generală a rezultatelor tipizării serologice este prezentată în tabelul Tabel1.1. În total, au fost izolate 12 serovaruri de Salmonella serogrupul IIIb, 48:i:z fiind singurul serovar care a fost izolat de la șerpi diferiți. S-au obținut probe de urmărire de la patru animale pe o perioadă cuprinsă între 1 și 22 de luni. Toți acești șerpi au fost colonizați permanent de tulpini de Salmonella serogrupul IIIb. Serotiparea a evidențiat tulpini identice la șarpele B. nasicornis 5 pe întreaga perioadă de urmărire (tabelul (Tabelul1).1). Identitatea clonală a acestor tulpini a fost demonstrată prin PFGE (Fig. (Fig.1).1). Ceilalți trei șerpi au prezentat modificări ale serovariilor de Salmonella colonizatoare pe parcursul urmăririi (Tabelul (Tabelul1).1). Șarpele B. nasicornis 2 a prezentat o schimbare de la serotipul Salmonella 17:l,v:z35 la serotipul Salmonella 48:i:z în decurs de o lună. Această tulpină a fost identică cu cea izolată de la B. nasicornis snake 3, așa cum reiese din PFGE (Fig. (Fig.1).1). Clone identice de Salmonella serotip 48:i:z, care erau diferite de cele izolate de la șerpii B. nasicornis, au fost, de asemenea, găsite în doi șerpi B. schlegelii (Fig. (Fig.1).1). Acest rezultat se poate datora faptului că cei doi șerpi B. nasicornis, precum și cei doi șerpi B. schlegelii, cu acest serovar fuseseră ținuți împreună înainte de acest studiu în scopul reproducerii. Toate celelalte animale examinate în cadrul acestui studiu au fost întotdeauna ținute singure în cuști separate. Analiza PFGE a tulpinii de Salmonella serotip 48:i:z izolată de la șarpele B. nasicornis 10 a arătat un model de benzi diferit.

Antibioticele au fost testate prin metoda de difuzie pe disc și au evidențiat sensibilitatea tuturor izolatelor de Salmonella la peniciline, cefalosporine, carbapeneme, aminoglicozide și fluorochinolone.

Nu este clar dacă șerpii au dobândit Salmonella in utero, perinatal, prin ingestia de pradă contaminată sau prin contactul cu fecalele contaminate ale altor reptile. În grupul nostru de studiu de 16 șerpi de companie, Salmonella serogrupul IIIb a prezentat o prevalență ridicată (81%). Numărul de șerpi examinați este prea mic pentru o analiză statistică, dar 100% dintre șerpii B. nasicornis au fost colonizați, în timp ce Salmonella serogrupul IIIb a fost detectabil doar la 50% dintre șerpii B. schlegelii. Această constatare se poate datora comportamentelor diferite ale speciilor de șerpi. B. nasicornis este un șarpe care locuiește la sol, în timp ce B. schlegelii locuiește în tufișuri și copaci. În special atunci când acești șerpi sunt ținuți în terarii, B. nasicornis are un risc ridicat de a intra în contact cu fecale contaminate. Observarea faptului că acei șerpi care au fost ținuți împreună pentru o perioadă de timp au prezentat izolate identice de Salmonella serogrupul IIIb susține ipoteza că colonizarea are loc în principal prin contactul cu fecalele contaminate. Mai mult, grupul de B. nasicornis a fost hrănit exclusiv cu rozătoare de la un furnizor ale cărui culturi de supraveghere pentru animale au fost în mod regulat negative pentru agenții patogeni enterici, inclusiv Salmonella spp. Prin urmare, transmiterea prin intermediul prăzii contaminate în acest grup de șerpi de reproducere este foarte puțin probabilă.

Studiul nostru este prima investigație prospectivă a prevalenței serovariilor de Salmonella serogrupa IIIb în două grupuri de reproducere a șerpilor de companie. Rezultatele noastre indică faptul că procente foarte mari de șerpi sunt colonizați cu Salmonella spp. Această constatare se aplică în mod evident în special la șerpii care trăiesc la sol. Pentru a preveni infecțiile cu Salmonella asociate reptilelor, Centrele pentru controlul și prevenirea bolilor au emis recomandări pentru manipularea reptilelor. Pe lângă recomandările standard, cum ar fi cea privind spălarea temeinică a mâinilor cu apă și săpun după manipularea reptilelor sau a cuștilor reptilelor, aceste recomandări stipulează că reptilele (i) nu ar trebui ținute în centrele de îngrijire a copiilor, (ii) ar trebui ținute în afara gospodăriilor cu copii mai mici de 1 an și cu persoane imunocompromise și (iii) nu ar trebui să li se permită să umble liber prin casă sau prin zona de locuit (4).

.