| Kat. sz. Y51 | OF Base Medium, 13x100mm-es tubus, 3ml | 20 vagy 100 tubus/doboz |
| Kat. sz. Y57 | OF Dextróz, 13x100mm-es cső, 3ml | 20 vagy 100 cső/doboz |
| Kat. sz. Y58 | OF fruktóz, 13x100mm-es tubus, 3ml | 20 vagy 100 tubus/doboz |
| Kat. sz. Y54 | OF Laktóz, 13x100mm-es tubus, 3ml | 20 vagy 100 tubus/doboz |
| Kat. sz. Y52 | OF Maltose, 13x100mm-es tubus, 3ml | 20 vagy 100 tubus/doboz |
| Kat. sz. Y53 | OF Mannitol, 13x100mm-es tubus, 3ml | 20 vagy 100 tubus/doboz |
| Kat. sz. Y55 | OF Szukróz, 13x100mm-es tubus, 3ml | 20 vagy 100 tubus/doboz |
| Kat. sz. Y56 | OF Xilóz, 13x100mm cső, 3ml | 20 vagy 100 cső/doboz |
CÉLKITŰZÉS
A Hardy Diagnostics OF alapközeg a szénhidrátok baktériumok általi oxidációjának vagy fermentációjának kimutatására ajánlott.
ÖSSZEFOGLALÁS
Az OF Basal Mediumot Hugh és Leifson fejlesztette ki, hogy segítse a gram-negatív baktériumok azonosítását egy adott szénhidrát oxidálására vagy fermentálására való képességük alapján. (6)
Más OF médiumokkal összehasonlítva Hugh és Leifson receptúrája alacsony pepton/szénhidrát arányt és minimális mennyiségű agart alkalmaz. A csökkentett peptonmennyiség csökkenti a lúgos aminok képződését, amelyek végső soron elfedhetik az oxidatív anyagcseréből esetleg keletkező kis mennyiségű savat. (5) A megnövelt szénhidrát a képződő sav mennyiségének növekedését eredményezi. A táptalajhoz hozzáadott kis mennyiségű agar félig szilárd szerkezetet biztosít, amely a reakció helyén koncentrálja a savat, megkönnyítve ezzel a pH-eltolódás vizuális értelmezését.
Az OF-teszt megfelelő elvégzéséhez egy organizmust kell beoltani minden egyes OF-médium két csőjébe. A beoltás után az egyik csövet ásványi olajjal vagy olvasztott paraffinnal borítjuk be. A másik csövet a levegő felé nyitva hagyjuk.
A szénhidrát oxidatív hasznosítása csak a nyitott csőben eredményez savtermelődést (sárga). A szénhidrát fermentatív hasznosítása a nyitott és a zárt csőben is savtermelődést (sárga) eredményez. A fedett csövekben a savasodást valódi erjedés eredményének tekintjük, míg a nyitott csövekben a savasodás kialakulása a jelen lévő szénhidrát oxidatív hasznosításának köszönhető. Az aszacharolitikus szervezetek egyik csőben sem termelnek savat.
FORMULA
Összetevők egy liter ionmentesített vízre:*
| Nátrium-klorid | 5.0gm |
| Kasein hasnyálmirigy emésztése | 2.0gm |
| Dikálium-foszfát | 0.3gm |
| Bromothymol Blue | 0.08gm |
| Agar | 2.0gm |
Ezenkívül az OF Media szénhidráttal 10.0gm/L specifikus szénhidrátot tartalmaz.
Végső pH 6,8 +/- 0,2 25ºC-on.
* A teljesítménykritériumoknak való megfeleléshez szükséges beállítás és/vagy kiegészítés.
TÁROLÁS ÉS TÁROLÁSI IDŐ
Tárolás: Átvételt követően 2-8ºC-on kell tárolni. (kivéve az Y51-es kategória, 2-30ºC-on tároljuk), közvetlen fénytől védve. A hordozókat nem szabad felhasználni, ha szennyeződésre, romlásra utaló jelek vannak rajtuk, vagy ha a lejárati idő lejárt. A termék fény- és hőmérsékletérzékeny; védje a fénytől, a túlzott hőtől és a fagyástól.
ELŐKÉSZÍTÉSEK
Mintavétel: A mintavétel nem alkalmazható, mivel ezt a táptalajt nem klinikai mintákból történő elsődleges izolálásra szánják. Általános szabályként a fertőző anyagot késedelem nélkül közvetlenül a laboratóriumba kell eljuttatni, és a túlzott hőtől és hidegtől védve kell tárolni. Ha a feldolgozás késik, a mintát megfelelő szállítóközegre kell oltani, és az oltásig hűteni kell. A mintagyűjtéssel kapcsolatos információkért tekintse meg a felsorolt hivatkozásokat. (1-5)
Felhasználási mód:
1. Hagyja, hogy a táptalaj szobahőmérsékletre kiegyenlítődjön.
2. Vegyünk tiszta, izolált kolóniákat 18-24 órás tenyészetből.
3. Minden egyes vizsgált organizmus esetében oltsuk be a csöveket két példányban. Az agarba szúrással oltsuk be az agar aljától kb. 1/4 hüvelyknyire.
4. Vigyen fel steril ásványi olajat, steril olvasztott paraffint vagy steril olvasztott vazelint a duplikált csövek egyikébe. Húzza meg a fedett cső kupakját, és lazítsa meg a nem fedett cső kupakját.
5. Inkubáljuk mindkét csövet aerob módon 35 ºC-on legfeljebb 14 napig.
6. Naponta vizsgálja meg a csöveket.
7. Az OF alapközegből (Y51-es kat. sz.) egy kontrollcsövet kell beoltani és az OF-tesztekkel párhuzamosan inkubálni.
AZ EREDMÉNYEK ÉRTÉKELÉSE
A pozitív szénhidráthasznosítási tesztet a táptalaj sárga színének kialakulása jelzi.
A negatív szénhidráthasznosítási tesztet a sárga szín hiánya jelzi (a közeg zöld marad vagy kékül).
Az anyagcsere módját a következőképpen határozzuk meg:
| Szénhidrát-hasznosítás | Nyitott cső (nincs fedőréteg) |
Zárt cső (olaj fedőréteg) |
|
| Oxidáció | Pozitív (sárga) | Negatív (zöld) | |
| Fermentáció | Pozitív (sárga) | Pozitív (sárga) | |
| Nem-oxidáló/nem erjesztő | Negatív (zöld vagy kék) | Negatív (zöld) | |
| Oxidáció és erjedés egyaránt | Pozitív (sárga) | Pozitív (sárga) | Pozitív (sárga) |
Megjegyzés: A színreakciókat az OF Base Medium (Cat. No. Y51) kontrollcsővel kell összehasonlítani.
KORLÁTOZÁSOK
Azok a szervezetek, amelyek csak a dextrózt oxidálják, más szénhidrátot nem fermentálnak. Más szénhidrátok csak oxidálódnak. Ezért az ilyen szervezetek egyéb szénhidrát-hasznosításának meghatározásakor a fedett (zárt) cső elhagyható.
Egyes mikroorganizmusok nem növekednek az OF alapközegben. A negatív reakció megerősítéséhez szükség lehet egy másik, dextróz tartalmú bázismédium használatára.
Egyes ásványi olajok savasak, és hibás eredményeket eredményezhetnek.
SZÜKSÉGES, DE NEM ELLÁTOTT ANYAGOK
A szokásos mikrobiológiai kellékek és berendezések, mint például hurkok, egyéb táptalajok, tamponok, steril ásványi olaj, applikációs pálcikák, égetők, inkubátorok stb. valamint szerológiai és biokémiai reagensek nem állnak rendelkezésre.
MINŐSÉGI KONTROLL
| Vizsgálati organizmusok | Inokulációs módszer* | Inkubálás | Eredmények | |||||||
| Idő | Hőmérséklet | Légkör | ||||||||
| Az alapközeg: | ||||||||||
| Escherichia coli ATCC® 25922 |
D | 18-48hr | 35°C | Aerob | Növ; nincs színváltozás (a teteje 48 órán belül kékülhet) a nyitott csőben és az olajjal fedett csőben | |||||
| OF Dextróz: | ||||||||||
| Escherichia coli ATCC® 25922 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerob | Növekedés: Escherichia coli ATCC® 25922 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerob | Növekedés: Escherichia coli Aerob; savas (sárga) reakció és gáz nyílt csőben és olajjal fedett csőben |
| Pseudomonas aeruginosa ATCC® 27853 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerob | Növekedés; savas (sárga) reakció a nyitott csőben; nincs változás az olajjal fedett csőben | |||||
| OF fruktóz: | ||||||||||
| Klebsiella pneumoniae ATCC® 13883 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerob | Növekedés: Klebsiella pneumoniae ATCC® 13883 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerob | Növekedés; savas (sárga) reakció nyitott és olajjal fedett csőben |
| Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerob | Növekedés, negatív erjedés és oxidáció – zöld | |||||
| Laktóz: | ||||||||||
| Enterobacter cloacae ATCC® 23355 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerob | Növekedés; savas (sárga) reakció nyitott és olajjal fedett csőben | |||||
| Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerob | Növekedés; negatív oxidáció és erjedés-zöld | |||||
| OF Maltose: | ||||||||||
| Klebsiella pneumoniae ATCC® 13883 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerob | Növekedés; savas (sárga) reakció nyitott és olajjal fedett csőben | |||||
| Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerob | Növekedés; egyik csőben sincs színváltozás | OF Mannitol: | ||||
| Enterococcus faecalis ATCC® 29212 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerob | Növekedés: (sárga) reakció nyitott és olajjal fedett csőben | |||||
| Escherichia coli ATCC® 25922 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerob | Növekedés; savas (sárga) reakció nyitott és olajjal fedett csőben | |||||
| Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerob | Növekedés, negatív oxidációs és fermentációs reakciók – zöld | |||||
| Szacharóz: | ||||||||||
| Enterobacter aerogenes ATCC® 13048 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerob | Növekedés; savas (sárga) reakció nyitott és olajjal fedett csőben | |||||
| Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerob | Növekedés; Negatív oxidáció és fermentáció – zöld | |||||
| az xilóz: | ||||||||||
| Enterobacter aerogenes ATCC® 13048 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerob | Növekedés; savas (sárga) reakció nyitott és olajjal fedett csőben | |||||
| Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerob | Növekedés; negatív oxidáció és fermentáció – zöld | |||||
Felhasználói minőségellenőrzés
Fizikai megjelenés
Az alapközegnek enyhén opálosnak és zöld színűnek kell lennie.
Escherichia coli (ATCC® 25922) oxidatív-fermentatív bázis (kat. sz. Y51) és OF Dextróz (kat. sz. Y57) táptalajon növekszik. Két példányban beoltva, ásványi olaj (Z79 kat. sz.) fedőréteggel ellátva minden két példány egyikére. Aerob módon inkubáltuk (a fedőcsövek kupakja le volt húzva) 24 órán keresztül 35 ºC-on.
Shigella flexneri (ATCC ® 12022) oxidatív-fermentatív bázis (Kat. sz. Y51) és OF Dextróz (Kat. sz. Y57) táptalajon tenyésztve. Két példányban beoltva, ásványi olaj (Z79 kat. sz.) fedőréteggel ellátva mindkét példány egyikére. Aerobikusan inkubáltuk (a fedőcsövek kupakja le volt húzva) 24 órán keresztül 35 ºC-on.
Pseudomonas aeruginosa (ATCC ® 27853) oxidatív-fermentatív bázison (Y51 kat. sz.) és OF Dextróz (Y57 kat. sz.) táptalajon tenyésztve. Két példányban beoltva, ásványi olaj (Z79 kat. sz.) fedőréteggel ellátva mindkét példány egyikére. 24 órán át aerob módon inkubáltuk (a fedőcsövek kupakja le volt húzva) 35 ºC-on.
Klebsiella pneumoniae (ATCC ® 13883) oxidatív-fermentatív bázison (Y51 kat. sz.) és OF Fructose (Y58 kat. sz.) táptalajon tenyésztve. Két példányban beoltva, ásványi olaj (Z79 kat. sz.) fedőréteggel ellátva mindkét példány egyikére. 24 órán át aerob módon inkubáltuk (a fedőcsövek kupakja le volt húzva) 35 ºC-on.
Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) oxidatív-fermentatív bázison (Y51 kat. sz.) és OF fruktóz (Y58 kat. sz.) táptalajon tenyésztve. Két példányban beoltva, ásványi olaj (Z79 kat. sz.) fedőréteggel ellátva mindkét példány egyikére. 24 órán át aerob módon inkubáltuk (a fedőcsövek kupakja le volt húzva) 35 ºC-on.
Enterobacter cloacae (ATCC ® 23355) oxidatív-fermentatív bázison (kat. sz. Y51) és OF Lactose (kat. sz. Y54) táptalajon tenyésztve. Két példányban beoltva, ásványi olaj (Z79 kat. sz.) fedőréteggel ellátva mindkét példány egyikére. 24 órán át aerob módon inkubáltuk (a fedőcsövek kupakja le volt húzva) 35 ºC-on.
Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) oxidatív-fermentatív bázison (Y51 kat. sz.) és OF Lactose (Y54 kat. sz.) táptalajon tenyésztve. Két példányban beoltva, ásványi olaj (Z79 kat. sz.) fedőréteggel ellátva mindkét példány egyikére. 24 órán át aerob módon inkubáltuk (a fedőcsövek kupakja le volt húzva) 35 ºC-on.
Enterococcus faecalis (ATCC ® 29212) oxidatív-fermentatív bázison (Y51 kat. sz.) és OF Mannitol (Y53 kat. sz.) táptalajon tenyésztve. Két példányban beoltva, ásványi olaj (Z79 kat. sz.) fedőréteggel ellátva mindkét példány egyikére. 24 órán keresztül aerob módon inkubáltuk (a fedőcsövek kupakja le volt húzva) 35 ºC-on.
Escherichia coli (ATCC ® 25922) oxidatív-fermentatív bázison (Y51 kat. sz.) és OF Mannitol (Y53 kat. sz.) táptalajon tenyésztve. Két példányban beoltva, ásványi olaj (Z79 kat. sz.) fedőréteggel ellátva mindkét példány egyikére. 24 órán keresztül aerob módon inkubáltuk (a fedőcsövek kupakja le volt húzva) 35 ºC-on.
Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) oxidatív-fermentatív bázison (Y51 kat. sz.) és OF Mannitol (Y53 kat. sz.) táptalajon tenyésztve. Két példányban beoltva, ásványi olaj (Z79 kat. sz.) fedőréteggel ellátva mindkét példány egyikére. 24 órán át aerob módon inkubáltuk (a fedőcsövek kupakja le volt húzva) 35 ºC-on.
Klebsiella pneumoniae (ATCC ® 13883) oxidatív-fermentatív bázison (Y51 kat. sz.) és OF Maltose (Y52 kat. sz.) táptalajon tenyésztve. Két példányban beoltva, ásványi olaj (Z79 kat. sz.) fedőréteggel ellátva mindkét példány egyikére. Aerob körülmények között inkubáltuk (a fedőcsövek kupakja le volt húzva) 24 órán keresztül 35 ºC-on.
Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) oxidatív-fermentatív bázison (Y51 kat. sz.) és OF Maltose (Y52 kat. sz.) táptalajon tenyésztve. Két példányban beoltva, ásványi olaj (Z79 kat. sz.) fedőréteggel ellátva mindkét példány egyikére. Aerob körülmények között inkubáltuk (a fedőcsövek kupakja le volt húzva) 24 órán keresztül 35 ºC-on.
Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) oxidatív-fermentatív bázison (Y51 kat. sz.) és OF Sucrose (Y55 kat. sz.) táptalajon tenyésztve. Két példányban beoltva, ásványi olaj (Z79 kat. sz.) fedőréteggel ellátva mindkét példány egyikére. 24 órán át aerob módon inkubáltuk (a fedőcsövek kupakja le volt húzva) 35 ºC-on.
Enterobacter aerogenes (ATCC ® 13048) oxidatív-fermentatív bázison (Y51 kat. sz.) és OF szacharóz (Y55 kat. sz.) táptalajon tenyésztve. Két példányban beoltva, ásványi olaj (Z79 kat. sz.) fedőréteggel ellátva mindkét példány egyikére. Aerob módon inkubáltuk (a fedőcsövek kupakja le volt húzva) 24 órán keresztül 35ºC-on
Enterobacter aerogenes (ATCC ® 13048) oxidatív-fermentatív bázis (Y51 kat. sz.) és OF Xylose (Y56 kat. sz.) táptalajon tenyésztve. Két példányban beoltva, ásványi olaj (Z79 kat. sz.) fedőréteggel ellátva mindkét példány egyikére. Aerob körülmények között inkubáltuk (a fedőcsövek kupakja le volt húzva) 24 órán keresztül 35 ºC-on.
Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) oxidatív-fermentatív bázison (kat. sz. Y51) és OF Xylose (kat. sz. Y56) táptalajon tenyésztve. Két példányban beoltva, ásványi olaj (Z79 kat. sz.) fedőréteggel ellátva mindkét példány egyikére. Aerob körülmények között inkubáltuk (a fedőcsövek kupakja le volt húzva) 24 órán keresztül 35 ºC-on.
1. Anderson, N.L., et al. Cumitech 3B; Minőségi rendszerek a klinikai mikrobiológiai laboratóriumban, koordináló szerkesztő, A.S. Weissfeld. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
2. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
. Jorgensen. et al. Manual of Clinical Microbiology, American Society for Microbiology, Washington, D.C.
3. Tille, P., et al. Bailey and Scott’s Diagnostic Microbiology, C.V. Mosby Company, St. Louis, MO.
4. Isenberg, H.D. Clinical Microbiology Procedures Handbook, Vol. I, II & III. Amerikai Mikrobiológiai Társaság, Washington, D.C.
5. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
. Koneman, E.W., et al. Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology, J.B. Lippincott Company, Philadelphia, PA.
6. Koneman, E.W., et al. Hugh, R. és Leifson, E.J. 1953. Bacteriol.; 66:24-26.
Az ATCC az American Type Culture Collection bejegyzett védjegye.
IFU-10625