| Kat. nr. Y51 | OF Base Medium, 13x100mm Tube, 3ml | 20 eller 100 tuber/box |
| Kat. nr. Y57 | OF Dextrose, 13x100mm Tube, 3ml | 20 eller 100 tuber/box |
| Kat. nr. Y58 | OF Fruktos, 13x100mm Tube, 3ml | 20 eller 100 tuber/box |
| Kat. nr. Y54 | OF Laktos, 13x100mm Tube, 3ml | 20 eller 100 tuber/box |
| Kat. nr. Y52 | OF Maltos, 13x100mm Tube, 3ml | 20 eller 100 tuber/box |
| Kat. nr. Y53 | OF Mannitol, 13x100mm Tube, 3ml | 20 eller 100 tuber/box |
| Kat. nr. Y55 | OF Sukros, 13x100mm Tube, 3ml | 20 eller 100 tuber/box |
| Kat. nr. Y56 | OF Xylose, 13x100mm Tube, 3ml | 20 eller 100 tuber/låda |
ANVÄNDNINGSOMRÅDE
Hardy Diagnostics OF Basal Medium rekommenderas för påvisande av oxidation eller fermentering av kolhydrater av bakterier.
SAMMANFATTNING
OF Basal Medium utvecklades av Hugh och Leifson för att underlätta identifiering av gramnegativa bakterier på grundval av deras förmåga att oxidera eller fermentera en specifik kolhydrat. (6)
Jämfört med andra OF-medier använder Hugh och Leifsons formel ett lågt förhållande mellan pepton och kolhydrater och en minimal mängd agar. Den minskade mängden pepton minskar bildandet av alkaliska aminer som i slutändan kan maskera de små mängder syra som kan produceras från oxidativ metabolism. (5) Den ökade mängden kolhydrater resulterar i en ökning av den mängd syra som kan bildas. Den lilla mängd agar som tillsätts till mediet ger en halvfast struktur som koncentrerar syran vid reaktionspunkten, vilket underlättar den visuella tolkningen av pH-skiftet.
För att OF-testet ska kunna utföras korrekt krävs att en organism inokuleras i två rör av varje OF-medium. När de är inokulerade överläggs det ena röret med mineralolja eller smält paraffin. Det andra röret lämnas öppet för luft.
Oxidativt utnyttjande av kolhydraten kommer att resultera i syraproduktion (gul) endast i det öppna röret. Fermentativt utnyttjande av kolhydraten kommer att resultera i syraproduktion (gul) i både det öppna och det slutna röret. Sura förändringar i de överlagrade rören anses vara ett resultat av äkta jäsning, medan syrautvecklingen i de öppna rören beror på oxidativt utnyttjande av den närvarande kolhydraten. Asackarolytiska organismer producerar inte syra i något av rören.
FORMEL
Ingredienser per liter avjoniserat vatten:*
| Natriumklorid | 5.0gm |
| Pankreatisk digestion av kasein | 2.0gm |
| Dikaliumfosfat | 0.3gm |
| Bromothymolblått | 0,08gm |
| Agar | 2,0gm |
Dessutom innehåller OF Media med kolhydrater 10,0gm/L specifik kolhydrat.
Slutligt pH 6,8 +/- 0,2 vid 25ºC.
* Justeras och/eller kompletteras vid behov för att uppfylla prestandakriterierna.
LAGERING OCH HÅLLBARHET
Lagring: Vid mottagande förvaras vid 2-8ºC. (utom kat. nr Y51, förvaras vid 2-30ºC.) borta från direkt ljus. Media bör inte användas om det finns tecken på kontaminering, försämring eller om utgångsdatumet har passerat. Produkten är ljus- och temperaturkänslig; skydda mot ljus, överdriven värme och frysning.
FÖRSKEDELSER
Provtagning: Provinsamling är inte tillämplig eftersom detta medium inte är avsett för primär isolering från kliniska prover. Som en allmän regel bör infektiöst material skickas direkt till laboratoriet utan dröjsmål och skyddas från överdriven värme och kyla. Om behandlingen försenas ska provet inokuleras på ett lämpligt transportmedium och kylas ned tills det inokuleras. Se de angivna referenserna för information om insamling av prover. (1-5)
Användningsmetod:
1. Låt medierna jämna ut sig till rumstemperatur.
2. Få fram rena, isolerade kolonier från en 18-24 timmars odling.
3. För varje testorganism, inokulera rören i två exemplar. Inokulera genom att sticka agaren till ungefär 1/4 tum från botten.
4. Applicera steril mineralolja, sterilt smält paraffin eller sterilt smält petrolatum på ett av varje duplikatrör. Dra åt locket på det överlagrade röret och lossa locket på det icke överlagrade röret.
5. Inkubera båda rören aerobt vid 35ºC i upp till 14 dagar.
6. Undersök rören dagligen.
7. Ett kontrollrör med OF-basmedium (kat. nr Y51) ska inokuleras och inkuberas parallellt med OF-testerna.
UTLÄGGNING AV RESULTATEN
Ett positivt kolhydratutnyttjandetest indikeras av utvecklingen av en gul färg i mediet.
Ett negativt test för kolhydratutnyttjande indikeras av avsaknad av en gul färg (mediet förblir grönt eller blir blått).
Metoden för metabolism bestäms enligt följande:
| Kolhydratutnyttjande | Öppet rör (Inget överdrag) |
Stängt rör (Oljeöverdrag) |
|
| Oxidation | Positiv (gul) | Negativ (grön) | |
| Jäsning | Positiv (gul) | Positiv (gul) | Positiv (gul) |
| Icke-oxidation/icke jäsning | Negativt (grönt eller blått) | Negativt (grönt) | |
| Både oxidation och jäsning | Positivt (gult) | Positivt (gult) |
Anmärkning: Färgreaktionerna bör jämföras med OF Base Medium (kat. nr Y51) kontrollrör.
BEGRÄNSNINGAR
Organismer som endast oxiderar dextros kommer inte att fermentera någon annan kolhydrat. Andra kolhydrater kommer endast att oxideras. Det överlagrade (slutna) röret kan därför utelämnas vid bestämning av sådana organismers utnyttjande av andra kolhydrater.
Vissa mikroorganismer växer inte i OF Basal Medium. Det kan vara nödvändigt att använda ett annat basalmedium som innehåller druvsocker för att bekräfta den negativa reaktionen.
Vissa mineraloljor är sura och kan ge felaktiga resultat.
MATERIAL SOM BEHÖVS MEN INTE FÖRSÖRJAS
Mikrobiologiska standardförnödenheter och -utrustning, t.ex. slingor, andra odlingsmedier, svabbar, steril mineralolja, applikatorpinnar, förbränningsugnar och inkubatorer etc., samt serologiska och biokemiska reagenser, tillhandahålls inte.
KVALITETSKONTROLL
| Testorganismer | Inokuleringsmetod* | Inkubation | Resultat | ||
| Tid | Temperatur | Atmosfär | |||
| av basmedium: | |||||
| Escherichia coli ATCC® 25922 |
D | 18-48hr | 35°C | Aerobisk | Växt; Ingen färgförändring (toppen kan bli blå vid 48 timmar) i öppet rör och i rör med oljeöverdrag |
| OF Dextrose: | |||||
| Escherichia coli ATCC® 25922 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobisk | Växt; Syrereaktion (gul) och gas i öppet rör och i rör med oljeöverdrag |
| Pseudomonas aeruginosa ATCC® 27853 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobisk | Växt; Syrereaktion (gul) i öppet rör; ingen förändring i rör med oljeöverdrag |
| Fruktos: | |||||
| Klebsiella pneumoniae ATCC® 13883 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobisk | Växt; Syrereaktion (gul) i öppna och oljeöverdragna rör |
| Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobisk | Växt, negativ jäsning och oxidation – grön |
| av laktos: | |||||
| Enterobacter cloacae ATCC® 23355 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobisk | Växt; Syrereaktion (gul) i öppna och oljeöverdragna rör |
| Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobisk | Växt; negativ oxidation och jäsning-grön |
| av maltos: | |||||
| Klebsiella pneumoniae ATCC® 13883 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobisk | Växt; Syrereaktion (gul) i öppna och oljeöverdragna rör |
| Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobisk | Växling; ingen färgförändring i något av rören | OF Mannitol: |
| Enterococcus faecalis ATCC® 29212 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobisk | Växt: (gul) reaktion i öppna och oljebehandlade rör |
| Escherichia coli ATCC® 25922 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobisk | Växt; Syrereaktion (gul) i öppna och oljeöverdragna rör |
| Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobisk | Växt, negativa oxidations- och jäsningsreaktioner – grönt |
| av sackaros: | |||||
| Enterobacter aerogenes ATCC® 13048 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobisk | Växt; Syrereaktion (gul) i öppna och oljeöverdragna rör |
| Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobisk | Växt; negativ oxidation och jäsning – grönt |
| av Xylose: | |||||
| Enterobacter aerogenes ATCC® 13048 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobisk | Växt; Syrereaktion (gul) i öppna och oljeöverdragna rör |
| Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobisk | Växt; negativ oxidation och jäsning – grön |
Användarens kvalitetskontroll
FYSISKT UTSEENDE
För basalmedier ska de vara lätt opalescenta och gröna i färgen.
Escherichia coli (ATCC® 25922) växer i Oxidative-Fermentative Base (kat. nr Y51) och OF Dextrose (kat. nr Y57) media. Inokulerade i två exemplar, med mineralolja (kat. nr Z79) överlagrat på ett av varje exemplar. Inkuberade aerobt (överlagringsrören hade fastgjorda lock) i 24 timmar vid 35ºC.
Shigella flexneri (ATCC ® 12022) som växte i media med Oxidative-Fermentative Base (kat. nr. Y51) och OF Dextrose (kat. nr. Y57). Inokulerade i två exemplar, med mineralolja (kat. nr Z79) överlagrat på ett av varje exemplar. Inkuberade aerobt (överlagringsrören hade fastgjorda lock) i 24 timmar vid 35 ºC.
Pseudomonas aeruginosa (ATCC ® 27853) växer i medierna Oxidative-Fermentative Base (kat. nr Y51) och OF Dextrose (kat. nr Y57). Inokulerade i två exemplar, med mineralolja (kat. nr Z79) överlagrat på ett av varje exemplar. Inkuberade aerobt (överlagringsrören hade fastgjorda lock) i 24 timmar vid 35 ºC.
Klebsiella pneumoniae (ATCC ® 13883) som växer i medierna Oxidative-Fermentative Base (kat. nr Y51) och OF Fructose (kat. nr Y58). Inokulerade i två exemplar, med mineralolja (kat. nr Z79) överlagrat på ett av varje exemplar. Inkuberade aerobt (överlagringsrören hade fastgjorda lock) i 24 timmar vid 35 ºC.
Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) som växer i medierna Oxidative-Fermentative Base (kat. nr Y51) och OF Fructose (kat. nr Y58). Inokulerade i två exemplar, med mineralolja (kat. nr Z79) överlagrat på ett av varje exemplar. Inkuberade aerobt (överlagringsrören hade fastgjorda lock) i 24 timmar vid 35 ºC.
Enterobacter cloacae (ATCC ® 23355) växer i medierna Oxidative-Fermentative Base (kat. nr Y51) och OF Lactose (kat. nr Y54). Inokulerade i två exemplar, med mineralolja (kat. nr Z79) överlagrat på ett av varje exemplar. Inkuberade aerobt (överlagringsrören hade fastgjorda lock) i 24 timmar vid 35 ºC.
Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) som växer i medierna Oxidative-Fermentative Base (kat. nr Y51) och OF Lactose (kat. nr Y54). Inokulerade i två exemplar, med mineralolja (kat. nr Z79) överlagrat på ett av varje exemplar. Inkuberade aerobt (överlagringsrören hade fastgjorda lock) i 24 timmar vid 35 ºC.
Enterococcus faecalis (ATCC ® 29212) som växer i medierna Oxidative-Fermentative Base (kat. nr Y51) och OF Mannitol (kat. nr Y53). Inokulerade i två exemplar, med mineralolja (kat. nr Z79) överlagrat på ett av varje exemplar. Inkuberade aerobt (överlagringsrören hade fastgjorda lock) i 24 timmar vid 35 ºC.
Escherichia coli (ATCC ® 25922) som växer i medierna Oxidative-Fermentative Base (kat. nr Y51) och OF Mannitol (kat. nr Y53). Inokulerade i två exemplar, med mineralolja (kat. nr Z79) överlagrat på ett av varje exemplar. Inkuberade aerobt (överlagringsrören hade fastgjorda lock) i 24 timmar vid 35 ºC.
Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) som växer i medierna Oxidative-Fermentative Base (kat. nr Y51) och OF Mannitol (kat. nr Y53). Inokulerade i två exemplar, med mineralolja (kat. nr Z79) överlagrat på ett av varje exemplar. Inkuberade aerobt (överlagringsrören hade fastgjorda lock) i 24 timmar vid 35 ºC.
Klebsiella pneumoniae (ATCC ® 13883) som växer i medierna Oxidative-Fermentative Base (kat. nr Y51) och OF Maltos (kat. nr Y52). Inokulerade i två exemplar, med mineralolja (kat. nr Z79) överlagrat på ett av varje exemplar. Inkuberade aerobt (överlagringsrören hade fastgjorda lock) i 24 timmar vid 35 ºC.
Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) som växer i medierna Oxidative-Fermentative Base (kat. nr Y51) och OF Maltos (kat. nr Y52). Inokulerade i två exemplar, med mineralolja (kat. nr Z79) överlagrat på ett av varje exemplar. Inkuberade aerobt (överlagringsrören hade fastgjorda lock) i 24 timmar vid 35 ºC.
Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) som växer i medierna Oxidative-Fermentative Base (kat. nr Y51) och OF Sucrose (kat. nr Y55). Inokulerade i två exemplar, med mineralolja (kat. nr Z79) överlagrat på ett av varje exemplar. Inkuberade aerobt (överlagringsrören hade fastgjorda lock) i 24 timmar vid 35 ºC.
Enterobacter aerogenes (ATCC ® 13048) växer i medierna Oxidative-Fermentative Base (kat. nr Y51) och OF Sucrose (kat. nr Y55). Inokulerade i två exemplar, med mineralolja (kat. nr Z79) överlagrat på ett av varje exemplar. Inkuberade aerobt (överlagringsrören hade åtdragna lock) i 24 timmar vid 35ºC
Enterobacter aerogenes (ATCC ® 13048) som växer i medierna Oxidative-Fermentative Base (kat.nr. Y51) och OF Xylose (kat.nr. Y56). Inokulerade i två exemplar, med mineralolja (kat. nr Z79) överlagrat på ett av varje exemplar. Inkuberade aerobt (överlagringsrören hade fastgjorda lock) i 24 timmar vid 35 ºC.
Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) som växer i medierna Oxidative-Fermentative Base (kat. nr Y51) och OF Xylose (kat. nr Y56). Inokulerade i två exemplar, med mineralolja (kat. nr Z79) överlagrat på ett av varje exemplar. Inkuberade aerobt (överlagringsrören hade fastgjorda lock) i 24 timmar vid 35 ºC.
1. Anderson, N.L., et al. Cumitech 3B; Quality Systems in the Clinical Microbiology Laboratory, Coordinating ed., A.S. Weissfeld. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
2. Jorgensen, et al. Manual of Clinical Microbiology, American Society for Microbiology, Washington, D.C.
3. Tille, P., et al. Bailey and Scott’s Diagnostic Microbiology, C.V. Mosby Company, St. Louis, MO.
4. Isenberg, H.D. Clinical Microbiology Procedures Handbook, Vol. I, II & III. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
5. Koneman, E.W., et al. Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology, J.B. Lippincott Company, Philadelphia, PA.
6. Hugh, R. och Leifson, E.J. 1953. Bacteriol.; 66:24-26.
ATCC är ett registrerat varumärke som tillhör American Type Culture Collection.
IFU-10625