Nr kat. Y51	OF Base Medium, probówka 13x100mm, 3ml	20 lub 100 probówek/opakowanie
Nr kat. Y57	OF Dextrose, 13x100mm Tube, 3ml	20 lub 100 probówek/box
Nr kat. Y58	OF Fruktoza, probówka 13x100mm, 3ml	20 lub 100 probówek/opakowanie
Nr kat. Y54	OF Lactose, 13x100mm Tube, 3ml	20 lub 100 probówek/box
Nr kat. Y52	OF Maltose, 13x100mm Tube, 3ml	20 lub 100 probówek/box
Nr kat. Y53	OF Mannitol, 13x100mm Tube, 3ml	20 lub 100 probówek/box
Nr kat. Y55	OF Sucrose, 13x100mm Tube, 3ml	20 lub 100 probówek/box
Nr kat. Y56	OF Xylose, 13x100mm Tube, 3ml	20 lub 100 probówek/box

ZALECANE ZASTOSOWANIE

Hardy Diagnostics OF Basal Medium jest zalecane do wykrywania utleniania lub fermentacji węglowodanów przez bakterie.

STRESZCZENIE

OF Basal Medium zostało opracowane przez Hugh i Leifsona, aby pomóc w identyfikacji bakterii gram-ujemnych na podstawie ich zdolności do utleniania lub fermentacji określonych węglowodanów. (6)

W porównaniu z innymi pożywkami OF, formuła Hugh i Leifsona wykorzystuje niski stosunek peptonu do węglowodanów i minimalną ilość agaru. Zmniejszona ilość peptonu zmniejsza tworzenie się amin alkalicznych, które mogą ostatecznie maskować małe ilości kwasu, które mogą być produkowane z metabolizmu oksydacyjnego. (5) Zwiększona ilość węglowodanów powoduje wzrost ilości kwasu, który może powstać. Niewielka ilość agaru dodana do pożywki zapewnia półstałą strukturę, która koncentruje kwas w punkcie reakcji, ułatwiając w ten sposób wizualną interpretację zmiany pH.

Prawidłowe wykonanie testu OF wymaga zaszczepienia organizmu do dwóch probówek z każdą pożywką OF. Po inokulacji, jedna probówka jest pokrywana olejem mineralnym lub roztopioną parafiną. Druga probówka jest pozostawiona otwarta dla powietrza.

Oksydacyjne wykorzystanie węglowodanów spowoduje produkcję kwasu (żółty) tylko w otwartej probówce. Fermentacyjne wykorzystanie węglowodanów spowoduje produkcję kwasu (kolor żółty) zarówno w otwartej jak i zamkniętej probówce. Zmiany kwasowe w nałożonych na siebie probówkach są uważane za wynik prawdziwej fermentacji, podczas gdy zmiany kwasowe w otwartych probówkach są spowodowane oksydacyjnym wykorzystaniem obecnych w nich węglowodanów. Organizmy asacharolityczne nie będą wytwarzać kwasu w żadnej z tych rurek.

FORMUŁA

Składniki na litr wody dejonizowanej:*

Chlorek sodu	5.0gm
Pancreatic Digest of Casein	2.0gm
Dipotassium Phosphate	0.3gm
Błękit bromotymolowy	0.08gm
Agar	2.0gm

Dodatkowo OF Pożywka z węglowodanami zawiera 10.0gm/L węglowodanów właściwych.

Końcowe pH 6,8 +/- 0,2 przy 25ºC.

* Dostosowane i/lub uzupełnione zgodnie z wymaganiami w celu spełnienia kryteriów wydajności.

PRZECHOWYWANIE I ŻYWOTNOŚĆ POKŁADOWA

Przechowywanie: Po otrzymaniu, przechowywać w temperaturze 2-8ºC. (z wyjątkiem nr kat. Y51, przechowywać w temperaturze 2-30ºC.) z dala od bezpośredniego światła. Nośnik nie powinien być używany, jeśli widoczne są jakiekolwiek oznaki zanieczyszczenia, pogorszenia jakości lub jeśli minęła data ważności. Produkt jest wrażliwy na światło i temperaturę; chronić przed światłem, nadmiernym ciepłem i zamarzaniem.

PRECAUTIONS

Pobieranie próbek: Pobieranie próbek nie ma zastosowania, ponieważ to podłoże nie jest przeznaczone do pierwotnej izolacji z próbek klinicznych. Ogólną zasadą jest, że materiał zakaźny powinien być niezwłocznie dostarczony bezpośrednio do laboratorium i chroniony przed nadmiernym ciepłem i zimnem. W przypadku opóźnienia w obróbce, próbka powinna być przeniesiona na odpowiednie podłoże transportowe i przechowywana w lodówce do czasu inokulacji. W celu uzyskania informacji na temat pobierania próbek należy zapoznać się z wymienionymi źródłami. (1-5)

Metoda użycia:

1. Umożliwić wyrównanie temperatury podłoża do temperatury pokojowej.

2. Uzyskać czyste, wyizolowane kolonie z hodowli trwającej 18-24 godziny.

3. Dla każdego badanego organizmu inokulować probówki w dwóch egzemplarzach. Inokulować przez nakłuwanie agaru do około 1/4 cala od dna.

4. Nanieść sterylny olej mineralny, sterylną roztopioną parafinę lub sterylne roztopione petrolatum do jednej z każdej zduplikowanej probówki. Dokręcić nakrętkę nakładanej probówki i poluzować nakrętkę niepokrytej probówki.

5. Inkubować obie probówki w warunkach tlenowych w temperaturze 35ºC przez okres do 14 dni.

6. Codziennie sprawdzać probówki.

7. Kontrolną probówkę z podłożem OF Base Medium (nr kat. Y51) należy zaszczepić i inkubować równolegle z próbami OF.

INTERPRETACJA WYNIKÓW

Na pozytywny wynik testu utylizacji węglowodanów wskazuje pojawienie się żółtego zabarwienia w podłożu.

Negatywny test utylizacji węglowodanów jest wskazywany przez brak żółtego koloru (pożywka pozostaje zielona lub zmienia kolor na niebieski).

Metodę metabolizmu określa się w następujący sposób:

.

Wykorzystanie węglowodanów	Otwarta probówka (Bez nakładania)	Zamknięta probówka (Nakładanie oleju)
Utlenianie	Pozytywny (Żółty)	Negatywny (Zielony)
Fermentacja	Pozytywny (Żółty)	Pozytywny (Żółty)
Nie-utleniacz/niefermentujący	Negatywny (Zielony lub Niebieski)	Negatywny (Zielony)
Zarówno utlenianie jak i fermentacja	Pozytywny (Żółty)	Pozytywny (Żółty)

Uwaga: Reakcje barwne powinny być porównywane do probówki kontrolnej OF Base Medium (nr kat. Y51). nr kat. Y51) probówka kontrolna.

OGRANICZENIA

Organizmy, które utleniają tylko dekstrozę, nie będą fermentować żadnych innych węglowodanów. Inne węglowodany będą tylko utleniane. Nakładana (zamknięta) rurka może być zatem pominięta przy oznaczaniu wykorzystania innych węglowodanów przez takie organizmy.

Niektóre mikroorganizmy nie rosną w podłożu OF Basal Medium. Może być konieczne użycie innej pożywki podstawowej zawierającej dekstrozę w celu potwierdzenia reakcji negatywnej.

Niektóre oleje mineralne są kwaśne i mogą powodować błędne wyniki.

MATERIAŁY WYMAGANE, ALE NIE DOSTARCZANE

Nie są dostarczane standardowe materiały i sprzęt mikrobiologiczny, takie jak pętle, inne podłoża hodowlane, wymazy, sterylny olej mineralny, patyczki do aplikatorów, spalarki i inkubatory itp. oraz odczynniki serologiczne i biochemiczne.

KONTROLA JAKOŚCI

.

Organizmy testowe	Metoda inokulacji*	Inkubacja			Wyniki
		Czas	Temperatura	Atmosfera
Podłoże podstawowe:
Escherichia coli ATCC® 25922	D	18-48h	35°C	Atmosfera	Wzrost; brak zmiany koloru (wierzchołek może stać się niebieski po 48 godzinach) w otwartej probówce i w probówce pokrytej olejem
OF Dextrose:
Escherichia coli ATCC® 25922	D	18-24hr	35°C	Aerobic	Rozrost; reakcja kwasowa (żółta) i gaz w otwartej probówce i w probówce pokrytej olejem
Pseudomonas aeruginosa ATCC® 27853	D	18-24hr	35°C	Aerobic	Growth; reakcja kwasowa (żółta) w otwartej probówce; bez zmian w probówce z nałożonym olejem
OF Fruktoza:
Klebsiella pneumoniae ATCC® 13883	D	18-24hr	35°C	Aerobic	Wzrost; kwaśny (żółty) odczyn w otwartej i pokrytej olejem probówce
Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240	D	18-24hr	35°C	Aerobic	Growth, negatywna fermentacja i utlenianie – zielony
OF Laktoza:
Enterobacter cloacae ATCC® 23355	D	18-24hr	35°C	Aerobowe	Wzrost; kwaśny (żółty) odczyn w otwartej i pokrytej olejem probówce
Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240	D	18-24hr	35°C	Aerobic	Growth; negatywne utlenianie i fermentacja-zielony
OF Maltoza:
Klebsiella pneumoniae ATCC® 13883	D	18-24hr	35°C	Aerobowe	Wzrost; kwaśna (żółta) reakcja w otwartej i pokrytej olejem probówce
Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240	D	18-24hr	35°C	Aerobic	Growth; bez zmiany koloru w żadnej z probówek
OF Mannitol:
Enterococcus faecalis ATCC® 29212	D	18-24hr	35°C	Aerobic	Wzrost: reakcja kwasowa (żółta) w otwartej i pokrytej olejem probówce
Escherichia coli ATCC® 25922	D	18-24hr	35°C	Aerobic	Growth; kwaśna (żółta) reakcja w otwartej i pokrytej olejem probówce
Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240	D	18-24hr	35°C	Aerobic	Growth, negatywne reakcje utleniania i fermentacji – zielone
OF Sucrose:
Enterobacter aerogenes ATCC® 13048	D	18-24hr	35°C	Aerobowe	Wzrost; kwaśny (żółty) odczyn w otwartej i pokrytej olejem probówce
Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240	D	18-24hr	35°C	Aerobic	Growth; negatywne utlenianie i fermentacja – zielony
OF Xylose:
Enterobacter aerogenes ATCC® 13048	D	18-24hr	35°C	Aerobowe	Rośnięcie; kwaśny (żółty) odczyn w otwartej i pokrytej olejem probówce
Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240	D	18-24hr	35°C	Aerobic	Growth; negatywne utlenianie i fermentacja – zielony

1. Anderson, N.L., et al. Cumitech 3B; Quality Systems in the Clinical Microbiology Laboratory, Coordinating ed., A.S. Weissfeld. American Society for Microbiology, Washington, D.C.

2. Jorgensen., et al. Manual of Clinical Microbiology, American Society for Microbiology, Washington, D.C.

3. Tille, P., et al. Bailey and Scott’s Diagnostic Microbiology, C.V. Mosby Company, St. Louis, MO.

4. Isenberg, H.D. Clinical Microbiology Procedures Handbook, Vol. I, II & III. American Society for Microbiology, Washington, D.C.

5. Koneman, E.W., et al. Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology, J.B. Lippincott Company, Philadelphia, PA.

6. Hugh, R. i Leifson, E.J. 1953. Bacteriol.; 66:24-26.

ATCC jest zastrzeżonym znakiem towarowym American Type Culture Collection.

IFU-10625

.