| Cat. no. Y51 | OF Base Medium, provetta 13x100mm, 3ml | 20 o 100 provette/scatola |
| Cat. no. Y57 | DI Destrosio, provetta 13x100mm, 3ml | 20 o 100 provette/scatola |
| Cat. no. Y58 | DI fruttosio, provetta 13x100mm, 3ml | 20 o 100 tubi/scatola |
| Cat. no. Y54 | Lattosio, provetta 13x100mm, 3ml | 20 o 100 tubi/scatola |
| Cat. no. Y52 | DI Maltosio, provetta 13x100mm, 3ml | 20 o 100 tubi/scatola |
| Cat. no. Y53 | DI Mannitolo, provetta 13x100mm, 3ml | 20 o 100 tubi/scatola |
| Cat. no. Y55 | Saccarosio, provetta 13x100mm, 3ml | 20 o 100 provette/scatola |
| Cat. no. Y56 | di Xilosio, provetta 13x100mm, 3ml | 20 o 100 provette/box |
USO PREVISTO
Hardy Diagnostics OF Basal Medium è raccomandato per la rilevazione di ossidazione o fermentazione di carboidrati da parte di batteri.
SOMMARIO
OF Basal Medium è stato sviluppato da Hugh e Leifson per aiutare l’identificazione di batteri gram-negativi sulla base della loro capacità di ossidare o fermentare un carboidrato specifico. (6)
Rispetto ad altri OF Media, la formula di Hugh e Leifson impiega un basso rapporto peptone/carboidrati e una quantità minima di agar. La quantità ridotta di peptone riduce la formazione di ammine alcaline che possono in definitiva mascherare le piccole quantità di acido che possono essere prodotte dal metabolismo ossidativo. (5) L’aumento dei carboidrati comporta un aumento della quantità di acido che si può formare. La piccola quantità di agar aggiunta al mezzo fornisce una struttura semi-solida che concentra l’acido nel punto di reazione, facilitando così l’interpretazione visiva dello spostamento del pH.
La corretta esecuzione del test OF richiede l’inoculazione di un organismo in due provette di ciascun mezzo OF. Una volta inoculato, una provetta viene ricoperta con olio minerale o paraffina fusa. L’altra provetta viene lasciata aperta all’aria.
L’utilizzo ossidativo del carboidrato porterà alla produzione di acido (giallo) solo nella provetta aperta. L’utilizzo fermentativo del carboidrato porterà alla produzione di acido (giallo) sia nel tubo aperto che in quello chiuso. I cambiamenti acidi nei tubi sovrapposti sono considerati il risultato di una vera fermentazione, mentre lo sviluppo acido nei tubi aperti è dovuto all’utilizzo ossidativo del carboidrato presente. Gli organismi asaccarolitici non produrranno acido in nessuno dei due tubi.
FORMULA
Ingredienti per litro di acqua deionizzata:*
| Cloruro di sodio | 5.0gm |
| Pancreatic Digest of Casein | 2.0gm |
| Fosfato dipotassico | 0.3gm |
| Blu di bromotimolo | 0.08gm |
| Agar | 2.0gm |
Inoltre, OF Media con carboidrato contiene 10.0gm/L di carboidrato specifico.
pH finale 6,8 +/- 0,2 a 25ºC.
* Regolato e/o integrato come richiesto per soddisfare i criteri di performance.
CONSERVAZIONE E DURATA
Conservazione: Al ricevimento, conservare a 2-8ºC. (eccetto Cat. n. Y51, conservare a 2-30ºC.) lontano dalla luce diretta. I supporti non devono essere utilizzati se vi sono segni di contaminazione, deterioramento o se la data di scadenza è passata. Il prodotto è sensibile alla luce e alla temperatura; proteggere dalla luce, dal calore eccessivo e dal congelamento.
PRECAUZIONI
Raccolta dei campioni: La raccolta di campioni non è applicabile poiché questo mezzo non è destinato all’isolamento primario da campioni clinici. Come regola generale, il materiale infetto dovrebbe essere presentato direttamente al laboratorio senza indugio e protetto da calore e freddo eccessivi. Se ci dovesse essere un ritardo nel trattamento, il campione dovrebbe essere inoculato su un mezzo di trasporto appropriato e refrigerato fino all’inoculazione. Consultare i riferimenti elencati per informazioni sulla raccolta dei campioni. (1-5)
Metodo d’uso:
1. Lasciare che i media si equilibrino a temperatura ambiente.
2. Ottenere colonie pure e isolate da una cultura di 18-24 ore.
3. Per ogni organismo in esame, inoculare le provette in duplicato. Inoculare infilzando l’agar a circa 1/4 di pollice dal fondo.
4. Applicare olio minerale sterile, paraffina fusa sterile o petrolato fuso sterile in una delle provette in duplicato. Stringa il tappo della provetta sovrapposta e allenti il tappo della provetta non sovrapposta.
5. Incubare entrambe le provette aerobicamente a 35ºC. per un massimo di 14 giorni.
6. Esaminare le provette ogni giorno.
7. Una provetta di controllo di OF Base Medium (Cat. no. Y51) dovrebbe essere inoculata e incubata in parallelo con i test OF.
INTERPRETAZIONE DEI RISULTATI
Un test di utilizzazione dei carboidrati positivo è indicato dallo sviluppo di un colore giallo nel terreno.
Un test di utilizzazione dei carboidrati negativo è indicato dall’assenza di un colore giallo (il mezzo rimane verde o diventa blu).
Il metodo del metabolismo è determinato come segue:
| Utilizzo dei carboidrati | Tubo aperto (Senza sovrapposizione) |
Tubo chiuso (Sovrapposizione olio) |
| Ossidazione | Positivo (Giallo) | Negativo (Verde) |
| Fermentazione | Positivo (Giallo) | Positivo (Giallo) |
| Non-ossidante/non fermentatore | Negativo (Verde o Blu) | Negativo (Verde) |
| Sia ossidazione che fermentazione | Positivo (Giallo) | Positivo (Giallo) |
Nota: Le reazioni di colore devono essere confrontate con la provetta di controllo OF Base Medium (Cat. n. Y51) con la provetta di controllo.
LIMITAZIONI
Gli organismi che ossidano solo il destrosio non fermenteranno nessun altro carboidrato. Altri carboidrati saranno solo ossidati. Il tubo sovrapposto (chiuso), quindi, può essere omesso quando si determina l’utilizzo di altri carboidrati di tali organismi.
Alcuni microrganismi non crescono in OF Basal Medium. Può essere necessario utilizzare un altro mezzo basale contenente destrosio per confermare la reazione negativa.
Alcuni oli minerali sono acidi e possono portare a risultati errati.
MATERIALI RICHIESTI MA NON FORNITI
Le forniture e le attrezzature microbiologiche standard come loop, altri terreni di coltura, tamponi, olio minerale sterile, bastoncini applicatori, inceneritori e incubatori, ecc, così come i reagenti sierologici e biochimici, non sono forniti.
CONTROLLO QUALITÀ
| Organismi di prova | Metodo di inoculazione* | Incubazione | Risultati | ||
| Tempo | Temperatura | Atmosfera | |||
| del mezzo di base: | |||||
| Escherichia coli ATCC® 25922 |
D | 18-48hr | 35°C | Aerobio | Crescita; nessun cambiamento di colore (la parte superiore può diventare blu a 48 ore) in provetta aperta e in provetta ricoperta di olio |
| Destrosio: | |||||
| Escherichia coli ATCC® 25922 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobico | Crescita; reazione acida (gialla) e gas in provetta aperta e in provetta sovrapposta all’olio |
| Pseudomonas aeruginosa ATCC® 27853 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobi | Crescita; reazione acida (gialla) in provetta aperta; nessun cambiamento in provetta sovrapposta all’olio |
| di fruttosio: | |||||
| Klebsiella pneumoniae ATCC® 13883 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobio | Crescita; reazione acida (gialla) in provetta aperta e sovrapposta all’olio |
| Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobi | Crescita, fermentazione negativa e ossidazione – verde |
| di lattosio: | |||||
| Enterobacter cloacae ATCC® 23355 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobio | Crescita; reazione acida (gialla) in provetta aperta e sovrapposta all’olio |
| Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobi | Crescita; ossidazione negativa e fermentazione verde |
| di maltosio: | |||||
| Klebsiella pneumoniae ATCC® 13883 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobica | Crescita; reazione acida (gialla) in provetta aperta e sovrapposta all’olio |
| Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobica | Crescita; nessun cambiamento di colore in entrambe le provette | OF Mannitol: |
| Enterococcus faecalis ATCC® 29212 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobico | Crescita: reazione acida (gialla) in provetta aperta e sovrapposta all’olio |
| Escherichia coli ATCC® 25922 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobio | Crescita; reazione acida (gialla) in provetta aperta e sovrapposta all’olio |
| Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobi | Crescita, reazioni negative di ossidazione e fermentazione – verde |
| di saccarosio: | |||||
| Enterobacter aerogenes ATCC® 13048 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobio | Crescita; reazione acida (gialla) in provetta aperta e sovrapposta all’olio |
| Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobi | Crescita; ossidazione negativa e fermentazione – verde |
| di Xilosio: | |||||
| Enterobacter aerogenes ATCC® 13048 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobico | Crescita; reazione acida (gialla) in provetta aperta e sovrapposta all’olio |
| Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobi | Crescita; ossidazione negativa e fermentazione – verde |
Controllo di qualità dell’utente
Aspetto fisico
dei terreni di base dovrebbe apparire leggermente opalescente e di colore verde.
Escherichia coli (ATCC® 25922) che cresce in mezzi Base Ossidativo-Fermentativo (Cat. no. Y51) e Destrosio OF (Cat. no. Y57). Inoculati in duplicato, con olio minerale (n. di catalogo Z79) applicato su uno di ogni duplicato. Incubato aerobicamente (i tubi di sovrapposizione avevano tappi serrati) per 24 ore a 35ºC.
Shigella flexneri (ATCC ® 12022) che cresce in base ossidativa-fermentativa (Cat. no. Y51) e OF Dextrose (Cat. no. Y57) media. Inoculato in duplicato, con olio minerale (Cat. no. Z79) sovrapposto ad uno di ogni duplicato. Incubato aerobicamente (i tubi di sovrapposizione avevano tappi stretti) per 24 ore a 35ºC.
Pseudomonas aeruginosa (ATCC ® 27853) che cresce in Oxidative-Fermentative Base (Cat. no. Y51) e OF Dextrose (Cat. no. Y57) media. Inoculato in duplicato, con olio minerale (Cat. no. Z79) sovrapposto ad uno di ogni duplicato. Incubato aerobicamente (i tubi di sovrapposizione avevano tappi stretti) per 24 ore a 35ºC.
Klebsiella pneumoniae (ATCC ® 13883) che cresce in base ossidativo-fermentativa (Cat. no. Y51) e OF Fructose (Cat. no. Y58) media. Inoculato in duplicato, con olio minerale (n. di catalogo Z79) applicato su uno di ogni duplicato. Incubato aerobicamente (i tubi di sovrapposizione avevano tappi stretti) per 24 ore a 35ºC.
Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) che cresce in base ossidativo-fermentativa (Cat. no. Y51) e OF Fructose (Cat. no. Y58) media. Inoculato in duplicato, con olio minerale (n. di catalogo Z79) applicato su uno di ogni duplicato. Incubato aerobicamente (i tubi di sovrapposizione avevano tappi stretti) per 24 ore a 35ºC.
Enterobacter cloacae (ATCC ® 23355) che cresce in base ossidativo-fermentativa (Cat. no. Y51) e OF Lactose (Cat. no. Y54) media. Inoculato in duplicato, con olio minerale (Cat. no. Z79) sovrapposto ad uno di ogni duplicato. Incubato aerobicamente (i tubi di sovrapposizione avevano tappi stretti) per 24 ore a 35ºC.
Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) che cresce in base ossidativo-fermentativa (Cat. no. Y51) e OF Lactose (Cat. no. Y54) media. Inoculato in duplicato, con olio minerale (Cat. no. Z79) sovrapposto ad uno di ogni duplicato. Incubato aerobicamente (i tubi di sovrapposizione avevano tappi stretti) per 24 ore a 35ºC.
Enterococcus faecalis (ATCC ® 29212) che cresce in base ossidativo-fermentativa (Cat. no. Y51) e OF Mannitol (Cat. no. Y53) media. Inoculato in duplicato, con olio minerale (Cat. no. Z79) sovrapposto ad uno di ogni duplicato. Incubato aerobicamente (i tubi di sovrapposizione avevano tappi stretti) per 24 ore a 35ºC.
Escherichia coli (ATCC ® 25922) che cresce in base ossidativo-fermentativa (Cat. no. Y51) e OF Mannitol (Cat. no. Y53) media. Inoculato in duplicato, con olio minerale (Cat. no. Z79) sovrapposto ad uno di ogni duplicato. Incubato aerobicamente (i tubi di sovrapposizione avevano tappi stretti) per 24 ore a 35ºC.
Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) che cresce in base ossidativo-fermentativa (Cat. no. Y51) e OF Mannitol (Cat. no. Y53) media. Inoculato in duplicato, con olio minerale (Cat. no. Z79) sovrapposto ad uno di ogni duplicato. Incubato aerobicamente (i tubi di sovrapposizione avevano i tappi serrati) per 24 ore a 35ºC.
Klebsiella pneumoniae (ATCC ® 13883) che cresce in base ossidativo-fermentativa (Cat. no. Y51) e OF Maltose (Cat. no. Y52) media. Inoculato in duplicato, con olio minerale (Cat. no. Z79) sovrapposto ad uno di ogni duplicato. Incubato aerobicamente (i tubi di sovrapposizione avevano tappi stretti) per 24 ore a 35ºC.
Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) che cresce in base ossidativo-fermentativa (Cat. no. Y51) e OF Maltose (Cat. no. Y52) media. Inoculato in duplicato, con olio minerale (Cat. no. Z79) sovrapposto ad uno di ogni duplicato. Incubato aerobicamente (i tubi di sovrapposizione avevano tappi stretti) per 24 ore a 35ºC.
Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) che cresce in base ossidativo-fermentativa (Cat. no. Y51) e OF Saccarosio (Cat. no. Y55) media. Inoculato in duplicato, con olio minerale (n. di catalogo Z79) sovrapposto ad uno di ogni duplicato. Incubato aerobicamente (i tubi di sovrapposizione avevano tappi stretti) per 24 ore a 35ºC.
Enterobacter aerogenes (ATCC ® 13048) che cresce in base ossidativa-fermentativa (Cat. no. Y51) e OF Sucrose (Cat. no. Y55) media. Inoculato in duplicato, con olio minerale (Cat. no. Z79) sovrapposto ad uno di ogni duplicato. Incubato aerobicamente (i tubi di sovrapposizione avevano tappi serrati) per 24 ore a 35ºC
Enterobacter aerogenes (ATCC ® 13048) che cresce in Oxidative-Fermentative Base (Cat. no. Y51) e OF Xylose (Cat. no. Y56) media. Inoculati in duplicato, con olio minerale (n. di catalogo Z79) applicato su uno di ogni duplicato. Incubato aerobicamente (i tubi di sovrapposizione avevano i tappi serrati) per 24 ore a 35ºC.
Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) che cresce in base ossidativo-fermentativa (Cat. no. Y51) e OF Xylose (Cat. no. Y56) media. Inoculato in duplicato, con olio minerale (n. di catalogo Z79) applicato su uno di ogni duplicato. Incubato aerobicamente (i tubi di sovrapposizione avevano tappi stretti) per 24 ore a 35ºC.
1. Anderson, N.L., et al. Cumitech 3B; Quality Systems in the Clinical Microbiology Laboratory, Coordinating ed., A.S. Weissfeld. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
2. Jorgensen, et al. Manual of Clinical Microbiology, American Society for Microbiology, Washington, D.C.
3. Tille, P., et al. Bailey and Scott’s Diagnostic Microbiology, C.V. Mosby Company, St. Louis, MO.
4. Isenberg, H.D. Clinical Microbiology Procedures Handbook, Vol. I, II & III. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
5. Koneman, E.W., et al. Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology, J.B. Lippincott Company, Philadelphia, PA.
6. Hugh, R. e Leifson, E.J. 1953. Bacteriol; 66:24-26.
ATCC è un marchio registrato della American Type Culture Collection.
IFU-10625