Mediu oxidativ-fermentativ (din mediul de bază)

Nr. cat. Y51	OF Base Medium, tub 13x100mm, 3ml	20 sau 100 tuburi/cutie
Nr. cat. Y57	OF Dextroză, tub 13x100mm, 3ml	20 sau 100 tuburi/cutie
Nr. cat. Y58	OF Fructoză, tub de 13x100mm, 3ml	20 sau 100 tuburi/cutie
Nr. cat. Y54	OF Lactose, 13x100mm Tube, 3ml	20 sau 100 tuburi/cutie
Nr. cat. Y52	OF Maltoză, 13x100mm Tub, 3ml	20 sau 100 tuburi/cutie
Nr. cat. Y53	OF Manitol, 13x100mm Tub, 3ml	20 sau 100 tuburi/cutie
Nr. cat. Y55	OF Sucroză, 13x100mm Tub, 3ml	20 sau 100 tuburi/cutie
Nr. cat. Y56	OF Xiloză, 13x100mm Tube, 3ml	20 sau 100 tuburi/cutie

UTILIZARE INTENȚIONATĂ

Hardy Diagnostics OF Basal Medium este recomandat pentru detectarea oxidării sau fermentării carbohidraților de către bacterii.

REZUMAT

OF Basal Medium a fost dezvoltat de Hugh și Leifson pentru a ajuta la identificarea bacteriilor gram-negative pe baza capacității lor de a oxida sau fermenta un anumit carbohidrat. (6)

În comparație cu alte medii OF, formula lui Hugh și Leifson utilizează un raport scăzut de peptonă/carbohidrați și o cantitate minimă de agar. Cantitatea redusă de peptonă reduce formarea de amine alcaline care, în cele din urmă, pot masca cantitățile mici de acid care pot fi produse de metabolismul oxidativ. (5) Creșterea cantității de carbohidrați duce la o creștere a cantității de acid care se poate forma. Cantitatea mică de agar agar adăugată în mediu oferă o structură semisolidă care concentrează acidul în punctul de reacție, facilitând astfel interpretarea vizuală a modificării pH-ului.

Efectuarea corectă a testului OF necesită ca un organism să fie inoculat în două tuburi din fiecare mediu OF. Odată inoculat, un tub este acoperit cu ulei mineral sau parafină topită. Celălalt tub este lăsat deschis la aer.

Utilizarea oxidativă a carbohidraților va duce la producerea de acid (galben) numai în tubul deschis. Utilizarea fermentativă a carbohidraților va duce la producerea de acid (galben) atât în tubul deschis, cât și în cel închis. Modificările acide din tuburile suprapuse sunt considerate a fi rezultatul unei fermentații adevărate, în timp ce evoluția acidă din tuburile deschise se datorează utilizării oxidative a carbohidraților prezenți. Organismele asacarolitice nu vor produce acid în niciunul dintre cele două tuburi.

FORMULA

Ingrediente la un litru de apă deionizată:*

Clorură de sodiu	5.0gm
Digest pancreatic de cazeină	2,0gm
Fosfat dipotasic
0.3gm
Albastru de bromotimol	0,08gm
Agar	2,0gm

În plus, mediul OF cu carbohidrați conține 10,0gm/L de carbohidrați specifici.

pH final 6,8 +/- 0,2 la 25ºC.

* Ajustat și/sau suplimentat după cum este necesar pentru a îndeplini criteriile de performanță.

DEPOZITARE ȘI DEPOZITARE

Depozitare: La recepție, se păstrează la 2-8ºC. (cu excepția nr. de cat. Y51, se depozitează la 2-30ºC.) departe de lumina directă. Mediile nu trebuie utilizate dacă există semne de contaminare, deteriorare sau dacă a trecut data de expirare. Produsul este sensibil la lumină și temperatură; protejați-l de lumină, căldură excesivă și îngheț.

PRECAUȚII

Recoltarea probelor: Colectarea specimenelor nu se aplică, deoarece acest mediu nu este destinat izolării primare din probe clinice. Ca regulă generală, materialul infecțios trebuie trimis direct la laborator fără întârziere și protejat de căldură și frig excesiv. În cazul în care există o întârziere în procesare, proba trebuie inoculată pe un mediu de transport adecvat și refrigerată până la inoculare. Consultați referințele enumerate pentru informații privind colectarea specimenelor. (1-5)

Metoda de utilizare:

1. Se lasă mediile să se echilibreze la temperatura camerei.

2. Obțineți colonii pure, izolate, dintr-o cultură de 18-24 ore.

3. Pentru fiecare organism testat, se inoculează tuburile în dublu exemplar. Se inoculează prin înjunghierea agarului până la aproximativ 1/4 inch de la fund.

4. Aplicați ulei mineral steril, parafină topită sterilă sau petrolatum topit steril pe unul din fiecare tub în duplicat. Se strânge capacul tubului suprapus și se slăbește capacul tubului care nu este suprapus.

5. Incubați ambele tuburi în mediu aerob la 35ºC. timp de până la 14 zile.

6. Examinați zilnic tuburile.

7. Un tub de control de mediu de bază OF (nr. de cat. Y51) trebuie inoculat și incubat în paralel cu testele OF.

INTERPRETAREA REZULTATELOR

Un test pozitiv de utilizare a carbohidraților este indicat prin apariția unei culori galbene în mediu.

Un test negativ de utilizare a carbohidraților este indicat de absența unei culori galbene (mediul rămâne verde sau devine albastru).

Metoda de metabolizare se determină după cum urmează:

Utilizare carbohidrați	Tub deschis (fără suprapunere)	Tub închis (suprapunere cu ulei)
Oxidare	Pozitiv (galben)	Negativ (verde)
Fermentare	Pozitiv (galben)	Pozitiv (galben)	Pozitiv (galben)
Non-oxidant/nefermentant	Negativ (verde sau albastru)	Negativ (verde)
Atât oxidarea, cât și fermentarea	Pozitiv (galben)	Pozitiv (galben)	Pozitiv (galben)

Notă: Reacțiile de culoare trebuie să fie comparate cu mediul de bază OF (Cat. nr. Y51) în tubul de control.

LIMITĂRI

Organismele care oxidează numai dextroza nu vor fermenta nici un alt carbohidrat. Ceilalți carbohidrați vor fi doar oxidați. Prin urmare, tubul suprapus (închis) poate fi omis atunci când se determină utilizarea altor carbohidrați de către astfel de organisme.

Unele microorganisme nu se dezvoltă în mediul bazal OF. Poate fi necesar să se utilizeze un alt mediu bazal care să conțină dextroză pentru a confirma reacția negativă.

Unele uleiuri minerale sunt acide și pot duce la rezultate eronate.

MATERIALE NECESARE, DAR NU SUNT PREVĂZUTE

Nu sunt furnizate consumabile și echipamente microbiologice standard, cum ar fi bucle, alte medii de cultură, tampoane, ulei mineral steril, bețișoare aplicatoare, incineratoare și incubatoare etc., precum și reactivi serologici și biochimici.

CONTROLUL CALITĂȚII

Organisme de testare	Metoda de inoculare*	Incubare			Rezultate
Organisme de testare	Metoda de inoculare*	Timp	Temperatură	Atmosferă	Rezultate
Din mediul de bază:
Escherichia coli ATCC® 25922	D	18-48hr	35°C	Aerobic	Creștere; nici o schimbare de culoare (partea superioară poate deveni albastră la 48 de ore) în tubul deschis și în tubul acoperit cu ulei
de dextroză:
Escherichia coli ATCC® 25922	D	18-24 ore	35°C	Aerobă	Creștere; reacție acidă (galbenă) și gaz în tub deschis și în tub acoperit cu ulei
Pseudomonas aeruginosa ATCC® 27853	D	18-24hr	35°C	Aerobă	Creștere; reacție acidă (galbenă) în tubul deschis; nici o schimbare în tubul acoperit cu ulei
De fructoză:
Klebsiella pneumoniae ATCC® 13883	D	18-24hr	35°C	Aerobă	Creștere; reacție acidă (galbenă) în tub deschis și acoperit cu ulei
Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240	D	18-24hr	35°C	Aerobă	Creștere, fermentare negativă și oxidare – verde
De lactoză:
Enterobacter cloacae ATCC® 23355	D	18-24hr	35°C	Aerobă	Creștere; reacție acidă (galbenă) în tub deschis și acoperit cu ulei
Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240	D	18-24hr	35°C	Aerobă	Creștere; oxidare negativă și fermentare-verde
De maltoză:
Klebsiella pneumoniae ATCC® 13883	D	18-24hr	35°C	Aerobă	Creștere; reacție acidă (galbenă) în tubul deschis și în tubul acoperit cu ulei
Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240	D	18-24hr	35°C	Aerobă	Creștere; nici o schimbare de culoare în ambele tuburi
OF Manitol:
Enterococcus faecalis ATCC® 29212	D	18-24 h	35°C	Aerobă	Creștere: reacție acidă (galbenă) în tub deschis și acoperit cu ulei
Escherichia coli ATCC® 25922	D	18-24hr	35°C	Aerobă	Creștere; reacție acidă (galbenă) în tub deschis și acoperit cu ulei
Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240	D	18-24hr	35°C	Aerobă	Creștere, reacții negative de oxidare și fermentare – verde
De zaharoză:
Enterobacter aerogenes ATCC® 13048	D	18-24hr	35°C	Aerobă	Creștere; reacție acidă (galbenă) în tub deschis și acoperit cu ulei
Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240	D	18-24hr	35°C	Aerobă	Creștere; oxidare negativă și fermentare – verde
de Xiloză:
Enterobacter aerogenes ATCC® 13048	D	18-24hr	35°C	Aerobă	Creștere; reacție acidă (galbenă) în tub deschis și acoperit cu ulei
Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240	D	18-24hr	35°C	Aerobă	Creștere; oxidare negativă și fermentație – verde

Controlul calității utilizatorului

Aparență fizică

De mediu bazal ar trebui să apară ușor opalescent, și de culoare verde.

Escherichia coli (ATCC® 25922) care crește în mediile Oxidative-Fermentative de bază (nr. de cat. Y51) și OF Dextroză (nr. de cat. Y57). Inoculat în două exemplare, cu ulei mineral (nr. de catalog Z79) aplicat pe unul din fiecare exemplar. Incubate aerob (tuburile de suprapunere au avut capacele strânse) timp de 24 de ore la 35ºC.

Shigella flexneri (ATCC ® 12022) care crește în mediile Oxidative-Fermentative Base (nr. cat. Y51) și OF Dextroză (nr. cat. Y57). Inoculat în două exemplare, cu ulei mineral (nr. de catalog Z79) aplicat pe unul din fiecare exemplar. S-a incubat în mediu aerob (tuburile de acoperire au avut capacele strânse) timp de 24 de ore la 35ºC.

Pseudomonas aeruginosa (ATCC ® 27853) care crește în mediile Oxidative-Fermentative Base (nr. cat. Y51) și OF Dextroză (nr. cat. Y57). Inoculat în două exemplare, cu ulei mineral (nr. de catalog Z79) aplicat pe unul din fiecare exemplar. S-a incubat în mediu aerob (tuburile de acoperire au avut capacele strânse) timp de 24 de ore la 35ºC.

Klebsiella pneumoniae (ATCC ® 13883) care crește în medii Oxidative-Fermentative Base (nr. de cat. Y51) și OF Fructose (nr. de cat. Y58). Inoculat în două exemplare, cu ulei mineral (nr. de catalog Z79) aplicat pe unul din fiecare exemplar. S-a incubat în mediu aerob (tuburile de acoperire au avut capacele strânse) timp de 24 de ore la 35ºC.

Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) care crește în medii Oxidative-Fermentative Base (nr. de cat. Y51) și OF Fructose (nr. de cat. Y58). Inoculat în două exemplare, cu ulei mineral (nr. de catalog Z79) aplicat pe unul din fiecare exemplar. S-a incubat în mediu aerob (tuburile de acoperire au avut capacele strânse) timp de 24 de ore la 35ºC.

Enterobacter cloacae (ATCC ® 23355) care crește în medii Oxidative-Fermentative Base (nr. de cat. Y51) și OF Lactose (nr. de cat. Y54). Inoculat în două exemplare, cu ulei mineral (nr. de catalog Z79) aplicat pe unul din fiecare exemplar. S-a incubat în mediu aerob (tuburile de acoperire au avut capacele strânse) timp de 24 de ore la 35ºC.

Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) care crește în medii Oxidative-Fermentative Base (nr. de cat. Y51) și OF Lactose (nr. de cat. Y54). Inoculat în două exemplare, cu ulei mineral (nr. de catalog Z79) aplicat pe unul din fiecare exemplar. S-a incubat în mediu aerob (tuburile de acoperire au avut capacele strânse) timp de 24 de ore la 35ºC.

Enterococcus faecalis (ATCC ® 29212) care crește în mediile Oxidative-Fermentative Base (nr. de cat. Y51) și OF Manitol (nr. de cat. Y53). Inoculat în două exemplare, cu ulei mineral (nr. de catalog Z79) aplicat pe unul din fiecare exemplar. S-a incubat în mediu aerob (tuburile de acoperire au avut capacele strânse) timp de 24 de ore la 35ºC.

Escherichia coli (ATCC ® 25922) care crește în medii Oxidative-Fermentative Base (nr. de cat. Y51) și OF Manitol (nr. de cat. Y53). Inoculat în două exemplare, cu ulei mineral (nr. de catalog Z79) aplicat pe unul din fiecare exemplar. S-a incubat în mediu aerob (tuburile de acoperire au avut capacele strânse) timp de 24 de ore la 35ºC.

Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) care crește în mediile Oxidative-Fermentative Base (nr. cat. Y51) și OF Manitol (nr. cat. Y53). Inoculat în două exemplare, cu ulei mineral (nr. de catalog Z79) aplicat pe unul din fiecare exemplar. S-a incubat în mediu aerob (tuburile de acoperire au avut capacele strânse) timp de 24 de ore la 35ºC.

Klebsiella pneumoniae (ATCC ® 13883) care crește în medii Oxidative-Fermentative Base (nr. de catalog Y51) și OF Maltose (nr. de catalog Y52). Inoculat în două exemplare, cu ulei mineral (nr. de catalog Z79) aplicat pe unul din fiecare exemplar. S-a incubat în mediu aerob (tuburile de acoperire au avut capacele strânse) timp de 24 de ore la 35ºC.

Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) care crește în mediile Oxidative-Fermentative Base (nr. cat. Y51) și OF Maltoză (nr. cat. Y52). Inoculat în două exemplare, cu ulei mineral (nr. de catalog Z79) aplicat pe unul din fiecare exemplar. S-a incubat în mediu aerob (tuburile de acoperire au avut capacele strânse) timp de 24 de ore la 35ºC.

Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) care crește în medii Oxidative-Fermentative Base (nr. de cat. Y51) și OF Zaharoză (nr. de cat. Y55). Inoculat în două exemplare, cu ulei mineral (nr. de catalog Z79) aplicat pe unul din fiecare exemplar. S-a incubat în mediu aerob (tuburile de acoperire au avut capacele strânse) timp de 24 de ore la 35ºC.

Enterobacter aerogenes (ATCC ® 13048) care crește în mediile Oxidative-Fermentative Base (nr. de cat. Y51) și OF Zaharoză (nr. de cat. Y55). Inoculat în două exemplare, cu ulei mineral (nr. de catalog Z79) aplicat pe unul din fiecare exemplar. Incubate aerob (tuburile de suprapunere au avut capacele strânse) timp de 24 de ore la 35ºC

Enterobacter aerogenes (ATCC ® 13048) crescând în mediile Oxidative-Fermentative Base (nr. de cat. Y51) și OF Xiloză (nr. de cat. Y56). Inoculat în două exemplare, cu ulei mineral (nr. de catalog Z79) aplicat pe unul din fiecare exemplar. S-a incubat în mediu aerob (tuburile de acoperire au avut capacele strânse) timp de 24 de ore la 35ºC.

Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) care crește în mediile Oxidative-Fermentative Base (nr. cat. Y51) și OF Xiloză (nr. cat. Y56). Inoculat în două exemplare, cu ulei mineral (nr. de catalog Z79) aplicat pe unul din fiecare exemplar. S-a incubat în mediu aerob (tuburile de acoperire au avut capacele strânse) timp de 24 de ore la 35ºC.

1. 2. Anderson, N.L., et al. Cumitech 3B; Sisteme de calitate în laboratorul de microbiologie clinică, ed. coordonatoare, A.S. Weissfeld. American Society for Microbiology, Washington, D.C.

2. Jorgensen. și colab. Manual of Clinical Microbiology, American Society for Microbiology, Washington, D.C.

3. Tille, P., și colab. Bailey and Scott’s Diagnostic Microbiology, C.V. Mosby Company, St. Louis, MO.

4. Isenberg, H.D. Clinical Microbiology Procedures Handbook, Vol. I, II & III. American Society for Microbiology, Washington, D.C.

5. 5. Koneman, E.W., et al. Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology, J.B. Lippincott Company, Philadelphia, PA.

6. Koneman, E.W., et al. Hugh, R. și Leifson, E.J. 1953. Bacteriol.; 66:24-26.

ATCC este o marcă înregistrată a American Type Culture Collection.

IFU-10625