| Cat. no. Y51 | OF Base Medium, 13x100mm Tube, 3ml | 20 of 100 tubes/box |
| Cat. no. Y57 | OF Dextrose, 13x100mm Tube, 3ml | 20 of 100 buisjes/box |
| Cat. no. Y58 | OF Fructose, 13x100mm Tube, 3ml | 20 of 100 buisjes/box |
| Cat. no. Y54 | OF Lactose, 13x100mm Tube, 3ml | 20 of 100 buisjes/box |
| Cat. no. Y52 | OF Maltose, 13x100mm Tube, 3ml | 20 of 100 buisjes/box |
| Cat. no. Y53 | OF Mannitol, 13x100mm Tube, 3ml | 20 of 100 buisjes/box |
| Cat. no. Y55 | OF Sucrose, 13x100mm Tube, 3ml | 20 of 100 buisjes/box |
| Cat. no. Y56 | OF Xylose, 13x100mm Tube, 3ml | 20 of 100 buisjes/box |
BEDOELD GEBRUIK
Hardy Diagnostics OF Basal Medium wordt aanbevolen voor de detectie van oxidatie of fermentatie van koolhydraten door bacteriën.
SAMENVATTING
OF Basal Medium werd ontwikkeld door Hugh en Leifson om te helpen bij de identificatie van gramnegatieve bacteriën op basis van hun vermogen om een specifiek koolhydraat te oxideren of te fermenteren. (6)
In vergelijking met andere OF-media maakt de formule van Hugh en Leifson gebruik van een lage pepton/koolhydraatverhouding en een minimale hoeveelheid agar. De verminderde hoeveelheid pepton vermindert de vorming van alkalische amines die uiteindelijk de kleine hoeveelheden zuur kunnen maskeren die uit het oxidatieve metabolisme kunnen worden geproduceerd. (5) De grotere hoeveelheid koolhydraten leidt tot een toename van de hoeveelheid zuur die kan worden gevormd. De kleine hoeveelheid agar die aan het medium is toegevoegd, zorgt voor een halfvaste structuur die het zuur op het punt van reactie concentreert, waardoor de visuele interpretatie van de pH-verschuiving wordt vergemakkelijkt.
Voor een juiste uitvoering van de OF-test moet een organisme worden geïnoculeerd in twee buisjes van elk OF-medium. Eenmaal geënt, wordt één buisje overgoten met minerale olie of gesmolten paraffine. De andere buis wordt opengelaten voor de lucht.
Oxidatieve benutting van het koolhydraat leidt alleen in het open buisje tot zuurproductie (geel). Fermentatief gebruik van het koolhydraat leidt tot zuurproductie (geel) in zowel de open als de gesloten buis. Zure veranderingen in de overdekte buisjes worden beschouwd als een resultaat van echte fermentatie, terwijl zure ontwikkeling in de open buisjes het gevolg is van oxidatieve benutting van het aanwezige koolhydraat. Asaccharolytische organismen zullen in geen van beide buisjes zuur produceren.
FORMULA
Ingrediënten per liter gedeïoniseerd water:*
| Natriumchloride | 5..0gm |
| Pancreatic Digest of Casein | 2.0gm |
| Dipotassium Phosphate | 0.3gm |
| Broomthymolblauw | 0.08gm |
| Agar | 2.0gm |
Bovendien bevat OF Media met koolhydraten 10.0gm/L specifiek koolhydraat.
Eind pH 6.8 +/- 0.2 bij 25ºC.
* Aangepast en/of aangevuld zoals vereist om aan de prestatiecriteria te voldoen.
OPSLAG EN HOUDBAARHEID
Opslag: Na ontvangst, bewaren bij 2-8ºC. (behalve Cat. no. Y51, bewaren bij 2-30ºC.) uit de buurt van direct licht. Media mogen niet worden gebruikt als er tekenen zijn van verontreiniging, bederf of als de houdbaarheidsdatum is verstreken. Product is licht- en temperatuurgevoelig; beschermen tegen licht, overmatige hitte en bevriezing.
VOORZORGSMAATREGELEN
Monstername: Monstername is niet van toepassing aangezien dit medium niet bedoeld is voor primaire isolatie van klinische monsters. Als algemene regel geldt dat besmettelijk materiaal onverwijld rechtstreeks naar het laboratorium moet worden gestuurd en tegen overmatige hitte en koude moet worden beschermd. Als er vertraging optreedt bij de verwerking, moet het monster op een geschikt transportmedium worden geïnoculeerd en tot de inoculatie worden gekoeld. Raadpleeg de vermelde referenties voor informatie over monsterafname. (1-5)
Wijze van gebruik:
1. Laat de media equilibreren tot kamertemperatuur.
2. Verkrijg zuivere, geïsoleerde kolonies van een kweek van 18-24 uur.
3. Inoculeer buizen in duplo voor elk testorganisme. Inoculeren door het steken van de agar tot ongeveer 1/4 inch van de bodem.
4. Breng steriele minerale olie, steriele gesmolten paraffine of steriele gesmolten petrolatum aan op één van de buisjes in duplo. Draai de dop van het overlappende buisje vast, en draai de dop van het niet-overlappende buisje los.
5. Incubeer beide buisjes aëroob bij 35ºC. gedurende maximaal 14 dagen.
6. Onderzoek de buisjes dagelijks.
7. Een controlebuisje met OF-basismedium (cat. nr. Y51) moet parallel met de OF-tests worden geïnoculeerd en geïncubeerd.
INTERPRETATIE VAN DE RESULTATEN
Een positieve test op het gebruik van koolhydraten wordt aangegeven door de ontwikkeling van een gele kleur in het medium.
Een negatieve koolhydraatbenuttingstest wordt aangegeven door de afwezigheid van een gele kleur (het medium blijft groen of wordt blauw).
De wijze van metabolisme wordt als volgt bepaald:
| Koolhydraatbenutting | Open buis (Geen overlay) |
Gesloten buis (Olie overlay) |
| Oxidatie | Positief (Geel) | Negatief (Groen) |
| Vergisting | Positief (Geel) | |
| Niet-oxidatie/Niet-vergister | Negatief (Groen of Blauw) | Negatief (Groen) |
| Zowel oxidatie als vergisting | Positief (Geel) | Positief (Geel) |
Opmerking: De kleurreacties moeten worden vergeleken met het OF Base Medium (Cat. no. Y51) controlebuis.
BEPERKINGEN
Organismen die alleen dextrose oxideren zullen geen andere koolhydraten fermenteren. Andere koolhydraten zullen alleen worden geoxideerd. De overdekte (gesloten) buis kan daarom worden weggelaten bij het bepalen van het gebruik van andere koolhydraten door dergelijke organismen.
Sommige micro-organismen groeien niet in OF Basal Medium. Het kan nodig zijn een ander basaal medium met dextrose te gebruiken om de negatieve reactie te bevestigen.
Sommige minerale oliën zijn zuur en kunnen tot foutieve resultaten leiden.
VEREIST MAAR NIET VERSTREKTE MATERIALEN
Standaard microbiologische benodigdheden en apparatuur zoals lussen, andere kweekmedia, swabs, steriele minerale olie, applicatorstaafjes, verbrandingsovens en incubatoren, enz., alsmede serologische en biochemische reagentia, worden niet verstrekt.
KWALITEITSCONTROLE
| Testorganismen | Inoculatiemethode* | Incubatie | Resultaten | ||
| Tijd | Temperatuur | Omgevingssfeer | |||
| OF Basismedium: | |||||
| Escherichia coli ATCC® 25922 |
D | 18-48hr | 35°C | Aerobic | Groei; geen kleurverandering (bovenkant kan blauw worden na 48 uur) in open buis en in met olie overgoten buis |
| OF Dextrose: | |||||
| Escherichia coli ATCC® 25922 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobic | Growth; zure (gele) reactie en gas in open buis en in met olie overgoten buis |
| Pseudomonas aeruginosa ATCC® 27853 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobic | Growth; zure (gele) reactie in open buis; geen verandering in olie overgoten buis |
| OF Fructose: | |||||
| Klebsiella pneumoniae ATCC® 13883 |
D | 18-24hr | 35°C | Aeroob | Groei; zure (gele) reactie in open en met olie overgoten buis |
| Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobic | Growth, negatieve gisting en oxidatie – groen |
| OF Lactose: | |||||
| Enterobacter cloacae ATCC® 23355 |
D | 18-24hr | 35°C | Aeroob | Groei; zure (gele) reactie in open en met olie overgoten buis |
| Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobic | Growth; negatieve oxidatie en fermentatie-groen |
| OF Maltose: | |||||
| Klebsiella pneumoniae ATCC® 13883 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobic | Growth; zure (gele) reactie in open en met olie overdekt buisje |
| Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobic | Growth; geen kleurverandering in beide buisjes | OF Mannitol: |
| Enterococcus faecalis ATCC® 29212 |
D | 18-24 uur | 35°C | Aërobe | Groei: zure (gele) reactie in open en met olie overgoten buis |
| Escherichia coli ATCC® 25922 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobic | Growth; zure (gele) reactie in open en met olie overgoten buis |
| Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobic | Growth, negatieve oxidatie en fermentatiereacties – groen |
| OF Sucrose: | |||||
| Enterobacter aerogenes ATCC® 13048 |
D | 18-24hr | 35°C | Aërobe | Groei; zure (gele) reactie in open en met olie overgoten buis |
| Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobic | Growth; negatieve oxidatie en gisting – groen |
| OF Xylose: | |||||
| Enterobacter aerogenes ATCC® 13048 |
D | 18-24hr | 35°C | Aeroob | Groei; zure (gele) reactie in open en met olie overgoten buis |
| Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240 |
D | 18-24hr | 35°C | Aerobic | Growth; negatieve oxidatie en fermentatie – groen |
Kwaliteitscontrole
FYSISCHE UITZICHT
OF Basal Media moet er licht opalescent uitzien, en groen van kleur zijn.
Escherichia coli (ATCC® 25922) groeiend in Oxidatief-Fermentatieve Basis (Cat. no. Y51) en OF Dextrose (Cat. no. Y57) media. Inoculeren in duplo, met minerale olie (cat. nr. Z79) overlay aangebracht op één van elk duplo. Aëroob geïncubeerd (overlaybuisjes hadden vastgemaakte doppen) gedurende 24 uur bij 35ºC.
Shigella flexneri (ATCC ® 12022) groeiend in Oxidatief-Fermentatieve Basis (Cat. no. Y51) en OF Dextrose (Cat. no. Y57) media. Inoculeren in duplo, met minerale olie (cat. nr. Z79) overlay aangebracht op één van elk duplo. Aëroob geïncubeerd gedurende 24 uur bij 35ºC (op de overlay-buizen waren de doppen vastgedraaid).
Pseudomonas aeruginosa (ATCC ® 27853) groeiend in Oxidatief-Fermentatieve Basis (Cat. no. Y51) en OF Dextrose (Cat. no. Y57) media. Inoculeren in duplo, met minerale olie (cat. nr. Z79) overlay aangebracht op één van elk duplo. Aëroob geïncubeerd gedurende 24 uur bij 35ºC (op de overlay-buizen werden de doppen gesloten).
Klebsiella pneumoniae (ATCC ® 13883) groeiend in Oxidatief-Fermentatieve Basis (Cat. no. Y51) en OF Fructose (Cat. no. Y58) media. Inoculeren in tweevoud, met minerale olie (cat. nr. Z79) overlay aangebracht op één van elk duplicaat. Aëroob geïncubeerd (oplegbuisjes met dichtgedraaide stoppen) gedurende 24 uur bij 35ºC.
Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) groeiend in Oxidatief-Fermentatieve Basis (Cat. no. Y51) en OF Fructose (Cat. no. Y58) media. Inoculeren in tweevoud, met minerale olie (cat. nr. Z79) overlay aangebracht op één van elk duplicaat. Aëroob geïncubeerd (oplegbuisjes met dichtgedraaide stoppen) gedurende 24 uur bij 35ºC.
Enterobacter cloacae (ATCC ® 23355) groeiend in Oxidatief-Fermentatieve Basis (Cat. no. Y51) en OF Lactose (Cat. no. Y54) media. Inoculeren in tweevoud, met minerale olie (cat. nr. Z79) overlay aangebracht op één van elk duplicaat. Aëroob geïncubeerd (oplegbuisjes met dichtgedraaide stoppen) gedurende 24 uur bij 35ºC.
Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) groeiend in Oxidatief-Fermentatieve Basis (Cat. no. Y51) en OF Lactose (Cat. no. Y54) media. Inoculeren in tweevoud, met minerale olie (cat. nr. Z79) overlay aangebracht op één van elk duplicaat. Aëroob geïncubeerd (oplegbuisjes met dichtgedraaide stoppen) gedurende 24 uur bij 35ºC.
Enterococcus faecalis (ATCC ® 29212) groeiend in Oxidatief-Fermentatieve Basis (Cat. no. Y51) en OF Mannitol (Cat. no. Y53) media. Inoculeren in tweevoud, met minerale olie (cat. nr. Z79) overlay aangebracht op één van elk duplicaat. Aëroob geïncubeerd (oplegbuisjes hadden dichtgedraaide doppen) gedurende 24 uur bij 35ºC.
Escherichia coli (ATCC ® 25922) groeiend in Oxidatief-Fermentatieve Basis (Cat. no. Y51) en OF Mannitol (Cat. no. Y53) media. Inoculeren in tweevoud, met minerale olie (cat. nr. Z79) overlay aangebracht op één van elk duplicaat. Aëroob geïncubeerd (oplegbuisjes hadden dichtgedraaide doppen) gedurende 24 uur bij 35ºC.
Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) groeiend in Oxidatief-Fermentatieve Basis (Cat. no. Y51) en OF Mannitol (Cat. no. Y53) media. Inoculeren in tweevoud, met minerale olie (cat. nr. Z79) overlay aangebracht op één van elk duplicaat. Gedurende 24 uur bij 35ºC aeroob geïncubeerd (op de overlay-buisjes waren de doppen vastgedraaid).
Klebsiella pneumoniae (ATCC ® 13883) groeiend in Oxidatief-Fermentatieve Basis (Cat. no. Y51) en OF Maltose (Cat. no. Y52) media. Inoculeren in tweevoud, met minerale olie (cat. nr. Z79) overlay aangebracht op één van elk duplicaat. Aëroob geïncubeerd gedurende 24 uur bij 35ºC (op de overlay-buizen werden de doppen gesloten).
Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) groeiend in Oxidatief-Fermentatieve Basis (Cat. no. Y51) en OF Maltose (Cat. no. Y52) media. Inoculeren in tweevoud, met minerale olie (cat. nr. Z79) overlay aangebracht op één van elk duplicaat. Aëroob geïncubeerd gedurende 24 uur bij 35ºC (op de overlay-buizen werden de doppen gesloten).
Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) groeiend in Oxidatief-Fermentatieve Basis (Cat. no. Y51) en OF Sucrose (Cat. no. Y55) media. Inoculeren in tweevoud, met minerale olie (cat. nr. Z79) overlay aangebracht op één van elk duplicaat. Aëroob geïncubeerd gedurende 24 uur bij 35ºC (op de overlay-buizen werden de doppen gesloten).
Enterobacter aerogenes (ATCC ® 13048) groeiend in Oxidatief-Fermentatieve Basis (Cat. no. Y51) en OF Sucrose (Cat. no. Y55) media. Inoculeren in tweevoud, met minerale olie (cat. nr. Z79) overlay aangebracht op één van elk duplicaat. Geïncubeerd aëroob (overlaybuisjes hadden vastgemaakte doppen) gedurende 24 uur bij 35ºC
Enterobacter aerogenes (ATCC ® 13048) groeiend in Oxidatief-Fermentatieve Basis (Cat. no. Y51) en OF Xylose (Cat. no. Y56) media. Inoculeren in tweevoud, met minerale olie (cat. nr. Z79) overlay aangebracht op één van elk duplicaat. Aëroob geïncubeerd gedurende 24 uur bij 35ºC (op de overlay-buizen werden de doppen gesloten).
Branhamella (Moraxella) catarrhalis (ATCC ® 25240) groeiend in Oxidatief-Fermentatieve Basis (Cat. no. Y51) en OF Xylose (Cat. no. Y56) media. Inoculeren in tweevoud, met minerale olie (cat. nr. Z79) overlay aangebracht op één van elk duplicaat. Aëroob geïncubeerd gedurende 24 uur bij 35ºC (op de overlay-buizen werden de doppen gesloten).
1. Anderson, N.L., et al. Cumitech 3B; Quality Systems in the Clinical Microbiology Laboratory, Coordinating ed., A.S. Weissfeld. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
2. Jorgensen., et al. Manual of Clinical Microbiology, American Society for Microbiology, Washington, D.C.
3. Tille, P., et al. Bailey and Scott’s Diagnostic Microbiology, C.V. Mosby Company, St. Louis, MO.
4. Isenberg, H.D. Clinical Microbiology Procedures Handbook, Vol. I, II & III. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
5. Koneman, E.W., et al. Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology, J.B. Lippincott Company, Philadelphia, PA.
6. Hugh, R. en Leifson, E.J. 1953. Bacteriol.; 66:24-26.
ATCC is een geregistreerd handelsmerk van de American Type Culture Collection.
IFU-10625