Nº Cat. Y51	DE MÉDIO BASAL, Tubo 13x100mm, 3ml	20 ou 100 tubos/caixa
Cat. no. Y57	DE Dextrose, Tubo 13x100mm, 3ml	20 ou 100 tubos/caixa
Cat. no. Y58	DE Frutose, 13x100mm Tubo, 3ml	20 ou 100 tubos/caixa
Cat. no. Y54	DE Lactose, Tubo 13x100mm, 3ml	20 ou 100 tubos/caixa
Cat. no. Y52	DE Maltose, 13x100mm Tubo, 3ml	20 ou 100 tubos/caixa
Cat. no. Y53	DE Manitol, 13x100mm Tubo, 3ml	20 ou 100 tubos/caixa
Cat. no. Y55	DE Sacarose, 13x100mm Tubo, 3ml	20 ou 100 tubos/caixa
Cat. no. Y56	DE Xilose, 13x100mm Tubo, 3ml	20 ou 100 tubos/caixa

UTILIZAÇÃO INTENDIDA

O Diagnóstico Hardy do Meio Basal é recomendado para a detecção de oxidação ou fermentação de hidratos de carbono por bactérias.

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RESUMO

DE Meio Basal foi desenvolvido por Hugh e Leifson para auxiliar na identificação de bactérias gram-negativas com base na sua capacidade de oxidação ou fermentação de um determinado carboidrato. (6)

Em comparação com outros OF Media, a fórmula de Hugh e Leifson emprega uma razão baixa de peptona/carboidrato de carbono e uma quantidade mínima de ágar. A menor quantidade de peptona reduz a formação de aminas alcalinas que podem, em última análise, mascarar as pequenas quantidades de ácido que podem ser produzidas a partir do metabolismo oxidativo. (5) O aumento da quantidade de carboidratos resulta num aumento da quantidade de ácido que pode ser formada. A pequena quantidade de ágar adicionado ao meio fornece uma estrutura semi-sólida que concentra o ácido no ponto de reação, facilitando assim a interpretação visual do deslocamento do pH.

O desempenho adequado do teste OF requer que um organismo seja inoculado em dois tubos de cada meio OF. Uma vez inoculado, um tubo é revestido com óleo mineral ou parafina derretida. O outro tubo é deixado aberto para o ar.

A utilização oxidativa do carboidrato resultará na produção de ácido (amarelo) apenas no tubo aberto. A utilização fermentativa do carboidrato resultará na produção de ácido (amarelo) tanto no tubo aberto como no fechado. As mudanças ácidas nos tubos sobrepostos são consideradas como resultado da fermentação verdadeira, enquanto o desenvolvimento ácido nos tubos abertos é devido à utilização oxidativa do carboidrato presente. Os organismos asacarolíticos não produzirão ácido em nenhum dos tubos.

FORMULA

Ingredientes por litro de água desionizada:*

Cloreto de sódio	5.0gm
Digest Pancreatic de Caseína	2.0gm
Fosfato Dipotássico	0.3gm
Azul de bromotimol	0.08gm
Ágar	2.0gm

Além disso, de Meios com hidratos de carbono contém 10.0gm/L de hidratos de carbono específicos.

pH final 6,8 +/- 0,2 a 25ºC.

* Ajustado e/ou complementado conforme necessário para satisfazer os critérios de desempenho.

ARMAZENAMENTO E VIDA ÚTIL

Armazenamento: Após a recepção, armazenar a 2-8ºC. (excepto Cat. nº Y51, armazenar a 2-30ºC.) longe da luz directa. Não devem ser utilizados suportes se houver quaisquer sinais de contaminação, deterioração ou se a data de validade tiver passado. O produto é sensível à luz e à temperatura; proteger da luz, do calor excessivo e do congelamento.

PRECAUÇÕES

Coleta de espécimes: A colheita de amostras não é aplicável, uma vez que este meio não se destina ao isolamento primário de amostras clínicas. Como regra geral, o material infeccioso deve ser submetido directamente ao laboratório sem demora e protegido de calor e frio excessivos. Se houver um atraso no processamento, o espécimen deve ser inoculado num meio de transporte apropriado e refrigerado até à inoculação. Consulte as referências listadas para obter informações sobre a coleta do espécime. (1-5)

Método de utilização:

1. Permitir que o meio se equilibre à temperatura ambiente.

2. Obter colónias puras e isoladas a partir de uma cultura de 18-24 horas.

3. Para cada organismo de teste, inocular tubos em duplicado. Inocular apunhalando o ágar até aproximadamente 1/4 de polegada do fundo.

4. Aplicar óleo mineral estéril, parafina derretida estéril ou petrolato derretido estéril em um dos tubos duplicados. Aperte a tampa do tubo sobreposto, e solte a tampa do tubo não sobreposto.

5. Incube ambos os tubos aerobiamente a 35ºC. durante até 14 dias.

6. Examinar os tubos diariamente.

7. Um tubo de controlo de OF Base Medium (Cat. nº Y51) deve ser inoculado e incubado em paralelo com os testes OF.

INTERPRETAÇÃO DE RESULTADOS

Um teste positivo de utilização de carboidratos é indicado pelo desenvolvimento de uma cor amarela no meio.

Um teste negativo de utilização de carboidratos é indicado pela ausência de uma cor amarela (o meio permanece verde ou fica azul).

O método de metabolismo é determinado da seguinte forma:

Utilização de carboidratos	Tubo aberto (Sem sobreposição)	Tubo fechado (Sobreposição de óleo)
Oxidação	Positivo (Amarelo)	Negativo (Verde)
Fermentação	Positivo (Amarelo)	Positivo (Amarelo)
Nãooxidante/não fermentador	Negativo (Verde ou Azul)	Negativo (Verde)
Tanto oxidação como fermentação	Positivo (Amarelo)	Positivo (Amarelo)

Nota: As reacções de cor devem ser comparadas com o meio base OF (Cat. nº Y51) tubo de controle.

LIMITAÇÕES

Organismos que só oxidam dextrose não fermentam nenhum outro carboidrato. Outros carboidratos só serão oxidados. O tubo sobreposto (fechado), portanto, pode ser omitido ao determinar a utilização de outros carboidratos de tais organismos.

Alguns microrganismos não crescem no meio basal. Pode ser necessário usar outro meio basal contendo dextrose para confirmar a reação negativa.

Alguns óleos minerais são ácidos e podem resultar em resultados errôneos.

MATERIAIS NECESSÁRIOS MAS NÃO FORNECIDOS

Material e equipamento microbiológico padrão, como loops, outros meios de cultura, esfregaços, óleo mineral estéril, paus aplicadores, incineradores, incubadoras, etc., bem como reagentes serológicos e bioquímicos, não são fornecidos.

CONTROLO DE QUALIDADE

Organismos de teste	Método de inoculação*	Incubação			Resultados
		Tempo	Temperatura	Atmosfera
OF Meio Base:
Escherichia coli ATCC® 25922	D	18-48hr	35°C	Aeróbico	Crescimento; sem mudança de cor (a parte superior pode ficar azul às 48 horas) em tubo aberto e em tubo sobreposto a óleo
OF Dextrose:
Escherichia coli ATCC® 25922	D	18-24hr	35°C	Aeróbico	Crescimento; reacção ácida (amarela) e gás em tubo aberto e em tubo sobreposto a óleo
Pseudomonas aeruginosa ATCC® 27853	D	18-24hr	35°C	Aeróbio	Crescimento; reacção ácida (amarela) em tubo aberto; nenhuma alteração no tubo sobreposto ao óleo
OF Frutose:
Klebsiella pneumoniae ATCC® 13883	D	18-24hr	35°C	Aeróbica	Crescimento; reacção ácida (amarela) em tubo aberto e óleo sobreposto
Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240	D	18-24hr	35°C	Aeróbio	Crescimento, fermentação e oxidação negativa – verde
OF Lactose:
Enterobacter cloacae ATCC® 23355	D	18-24hr	35°C	Aeróbio	Crescimento; reacção ácida (amarela) em tubo aberto e óleo sobreposto
Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240	D	18-24hr	35°C	Aeróbio	Crescimento; oxidação negativa e fermentação-verde
OF Maltose:
Klebsiella pneumoniae ATCC® 13883	D	18-24h	35°C	Aeróbio	Crescimento; reacção ácida (amarela) em tubo aberto e óleo sobreposto
Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240	D	18-24hr	35°C	Aeróbico	Crescimento; nenhuma mudança de cor em qualquer dos tubos
OF Manitol:
Enterococcus faecalis ATCC® 29212	D	18-24hr	35°C	Aeróbio	Crescimento: reacção ácida (amarela) em tubo aberto e óleo sobreposto
Escherichia coli ATCC® 25922	D	18-24hr	35°C	Aeróbico	Crescimento; reacção ácida (amarela) em tubo aberto e óleo sobreposto
Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240	D	18-24hr	35°C	Aeróbio	Crescimento, reacções negativas de oxidação e fermentação – verde
OF Sacarose:
Enterobacter aerogenes ATCC® 13048	D	18-24hr	35°C	Aeróbico	Crescimento; reacção ácida (amarela) em tubo aberto e óleo sobreposto
Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240	D	18-24hr	35°C	Aeróbio	Crescimento; oxidação negativa e fermentação – verde
OF Xilose:
Enterobacter aerogenes ATCC® 13048	D	18-24hr	35°C	Aeróbio	Crescimento; reacção ácida (amarela) em tubo aberto e óleo sobreposto
Branhamella (Moraxella) catarrhalis ATCC® 25240	D	18-24hr	35°C	Aeróbio	Crescimento; oxidação negativa e fermentação – verde

1. Anderson, N.L., et al. Cumitech 3B; Sistemas de Qualidade no Laboratório de Microbiologia Clínica, Ed. Coordenadora, A.S. Weissfeld. American Society for Microbiology, Washington, D.C.

2. Jorgensen., et al. Manual of Clinical Microbiology, American Society for Microbiology, Washington, D.C.

3. Tille, P., et al. Bailey and Scott’s Diagnostic Microbiology, C.V. Mosby Company, St. Louis, MO.

4. Isenberg, H.D. Clinical Microbiology Procedures Handbook, Vol. I, II & III. American Society for Microbiology, Washington, D.C.

5. Koneman, E.W., et al. Color Atlas e Textbook of Diagnostic Microbiology, J.B. Lippincott Company, Philadelphia, PA.

6. Hugh, R. e Leifson, E.J. 1953. Bacteriol.; 66:24-26.

ATCC é uma marca registrada da American Type Culture Collection.

IFU-10625